[发明专利]一种呕吐毒素半定量速测试剂条的制备与使用方法

权利要求书

1.一种呕吐毒素半定量速测试剂条的制备方法，其特征如下：

速测试剂条由样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和样品吸收垫四部分组成；样品垫和样品吸收垫为：吸水纸；金标垫为：用胶体金和呕吐毒素抗体结合制成金标抗体，结合过程为：将50mL浓度为1×10^-4g/mL的氯金酸溶液加热到沸腾，然后迅速加入1.5mL柠檬酸三钠，继续加热搅拌反应15分钟得到胶体金溶液，然后将抗体溶液以1∶1体积比的比例逐滴加入到胶体金溶液中，边加边搅拌，反应5分钟后，即得到金标抗体溶液，将制备好的金标抗体调成A₅₄₀＝1.0的浓度，分散在玻璃纤维滤膜上，自然干燥后即为金标垫备用；所用硝酸纤维素膜为：用自动点样仪对硝酸纤维素膜进行检测试剂线性包被，下端横线包被呕吐毒素抗原DON-O-BSA，浓度为1mg/mL为检测线，上端横线包被羊抗鼠IgG，浓度为2mg/mL为控制线，包被检测线和控制线后的硝酸纤维素膜自然干燥后用0.1mol/L的BSA的pH7.4的PBS溶液浸泡30min进行封闭处理，干燥后备用；将样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和样品吸收垫四部分依次相互叠加粘贴于试剂板上，以宽3.5mm/条切条后即为呕吐毒素半定量速测试剂条。

2.如权利要求1所述方法制备的呕吐毒素半定量速测试剂条的应用方法，其特征是：

(1)检测小麦，玉米或稻谷：

准确称取5g粉碎均匀的样品于三角瓶中，加入25mL体积浓度10％的甲醇水溶液作为提取液，振荡10min，以定性滤纸快速过滤，收集滤液，取滤液用试剂条进行检测分析；

或(2)检测啤酒、或麦芽汁：

取一定量的啤酒样品，搅拌，除去过量的CO₂，直至不产生明显的气泡，静置后用试剂条进行检测分析；麦芽汁样品直接用试剂条进行检测分析；

或(3)检测面包、或蛋糕：

用粉碎机将样品粉碎，室温保存，称取20g粉碎试样，置于200mL具塞锥形瓶中，加入8mL水和100mL三氯甲烷-无水乙醇，三氯甲烷-无水乙醇的体积比为8∶2，密塞，在瓶塞上涂层水，盖严防漏，震荡1小时，通过折叠快速定性滤纸过滤，取25mL滤液于75mL玻璃蒸发皿中，置于90℃水浴上通风挥干，用50mL石油醚分次溶解蒸发皿中的残渣，洗入100mL分液漏斗中，再用20mL甲醇水，甲醇∶水体积比为8∶2，分次洗涤蒸发皿，转入同一分液漏斗中，振摇分液漏斗1.5分钟，静置15分钟后使分层，将下层甲醇水提取液进行样品检测。