[发明专利]一株产苝醌化合物的竹黄菌株

说明书

技术领域

一株产苝醌化合物的竹黄菌株，属于生物工程技术领域。本发明涉及一种高产苝醌化合物的竹黄菌株，该菌株对于苝醌化合物的工业化生产有着重要意义。

背景技术

在自然界中不同种属的许多真菌都能产生具有苝醌骨架的代谢产物(李聪，谢金伦.肉座菌科三种药用真菌的化学成分分析比较.中草药.2000，31(4)：250.)，而近年来研究工作多集中在竹红菌素，尾孢素和金丝桃蒽酮等的光动力学和立体化学上。其中竹红菌素具有稳定性好，口服无明显副作用，代谢快，溶于众多有机溶剂而不溶于水等一系列特点。作为一种重要的天然光敏色素，竹红菌素在医药和食品领域等有着巨大的潜在应用价值。在野生的竹黄菌和竹红菌等子实体中均含有竹红菌素。竹红菌素包括如下结构式所示的竹红菌甲素和竹红菌乙素。

专利CN01135155.1介绍了一种采用竹红菌Hypocrella bambusae产苝醌类化合物的方法。刘为忠(《苝醌类化合物产生菌固态发酵工艺研究》，云南大学学报，2000，225(5)389-391)和李聪(《一株产苝醌类化合物的真菌成分分析》，菌物系统，2000，19(1)：122-127)等报导了产苝醌类化合物的真菌。

陈佳佳(《竹黄无性株的液态发酵工艺研究》，中药材，2005，(12).1049-1051)、石贵阳(《竹黄菌液体培养条件下生成竹红菌素的研究》药物生物技术，2004，(5)，299-301)、李达旭(《一种竹寄生真菌的分离鉴定及其有效成分发酵的初步研究》四川大学学报(自然科学版)，2003，(1)，139-143)和发明人(《竹黄菌固态发酵竹红菌素条件的研究》生物技术，2004，(4)，46-47)也曾采用野生竹黄菌进行了竹红菌素的发酵研究。

但已报导的菌种竹红菌素产量低而不稳定，这些报导均未开展后续的进一步的研究，无法应用于工业化的生产。本发明经过从天然的竹黄菌子实体中筛选得到了性状稳定，产苝醌类化合物的竹黄菌新菌株Shiraia sp.SUPER-H168。

发明内容

本发明的目的是提供一株产苝醌化合物的竹黄菌株，得到了性状稳定，产苝醌类化合物的竹黄菌菌株，可通过固态或液态发酵生产苝醌化合物。

本发明的技术方案：一种产苝醌化合物的竹黄菌株，其分类命名为竹黄菌(Shiraia sp.)SUPER-H168，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCM 207104。

该菌株的分子生物学18S rDNA序列，其核苷酸序列为SEQ ID NO：1。

该菌株的分子生物学ITS 5.8S rDNA序列，其核苷酸序列为SEQ ID NO：2。

该菌株经过生物学手段改造后的18S rDNA和ITS 5.8S rDNA与出发菌株CCTCC M 207104同源性达95％以上的菌株，仍可产竹红菌素，仍视为该菌株的权利范围。

该菌株其主要代谢产物为竹红菌甲素和竹红菌乙素。

该菌株还产生Shiraia sp.SUPER-H168代谢物母核的苝醌化合物。

该菌株可利用的碳源为葡萄糖、果糖、麦芽糖、木糖、蔗糖、乳糖、半乳糖、乳清、木薯、玉米、甜菜、纤维素或大米。

该菌株可利用的氮源为无机铵盐、无机硝酸盐、蛋白胨、酵母膏、尿素、玉米浆或豆饼粉。

清明前后采集江苏无锡马山地区着生于短蕙竹上的竹黄子实体。要求个体肥大，表面呈浅粉红色，没有龟裂、无胶质分泌的幼嫩子实体作为分离材料。将大小合适的竹黄子实体首先用无菌水洗涤干净，然后用预先配置好的75％浓度的酒精溶液浸泡1-2分钟，待酒精挥发干后，将竹黄子实体进行表面灭菌，然后用无菌的解剖刀将其内部组织切割成绿豆大小的颗粒植于分离琼脂平板表面，在无菌条件下将其轻轻压入琼脂中培养。经培养后真菌以植入点为中心向四周扩散生长而分离。分离用培养基为：马铃薯200g、葡萄糖10g、琼脂20g、水1000mL、青霉素20mg，竹叶汁20g，pH值自然。26℃恒温，培养4-5天。

初筛后发现，产竹红菌素的能力相差很大。选择菌落色泽较深的菌落进行复筛培养。最终得到产竹红菌素能力最强的竹黄新菌株Shiraia sp.SUPER-H168。

本发明涉及到的菌种有如下特征

1.竹黄菌(Shiraia sp.)SUPER-H168培养条件