[发明专利]一种喜树果的有效组分及其制备方法与用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种治疗肿瘤疾病的中药提取物，具体地说涉及从喜树果中提取的有效组分，制剂及其制备方法与用途。

背景技术

肿瘤是一种常见病、多发病，其中恶性肿瘤是目前危害人类健康最严重的一类疾病。目前业内对恶性肿瘤的治疗主要还是以手术、放疗、化疗为主，但许多化学抗癌药物在作用于靶细胞时往往累及正常细胞，造成严重的副反应。植物药的遗传毒性不明显，中草药在抗癌抗突变方面有独特的优势和广阔的应用前景，而且中药在对肿瘤的辅助治疗中也起到不容忽视的作用。紫杉醇即是典型的从植物中获得的具有良好抗癌活性的天然化合物，现已开发为抗肿瘤药物。目前我国危害性最为严重的肿瘤为肺癌、鼻咽癌、食管癌、胃癌、大肠癌、肝癌、乳腺癌、宫颈癌、白血病及淋巴瘤等。特别是肝癌的发生率近年来有所增加。值得重视，这些肿瘤的病因学、发病学及其防治，均为我国肿瘤研究的重点。寻找高效低毒的抗癌药物以及抗癌辅助药物是当前肿瘤研究的重要内容。

我国药用生物资源十分丰富，其生理活性物质是研究和发现新药先导化学物，开发新药的天然宝库。目前，我国从天然产物中提取活性物质，用于开发成治疗肿瘤疾病、安全性好、毒性低的新药还很少，从天然产物中提取活性物质，开发成具有抗肿瘤疗效的新药，具有重要应用价值和广阔发展前景。

喜树果，别名千丈树、水栗子、天梓树。其化学成分为：含喜树碱(camptothecine)、喜树次碱(venoterpine)、10-羟基喜树碱(10-hydroxycamptothecine)、10-甲氧基喜树碱(10-methoxycamptothecine)、白桦脂酸(betulic acid)、长春甙内酰胺(vincoside-lactam)等。其性味性寒，味苦、涩；有毒。其功能主治为：抗癌，散结，破血化瘀用于多种肿瘤，如胃癌、肠癌、绒毛膜上皮癌、淋巴肉瘤等。

发明内容：

本发明的目的在于提供喜树果的有效组分。

本发明的另一目的在于提供上述喜树果有效组分的制备方法。

本发明还提供含有上述喜树果有效组分的制剂及该组分的用途。

本发明的喜树果有效组分，其制备过程包括以下步骤：

步骤1：用乙酸乙酯和乙醇混合物作为溶剂对喜树果进行提取，

步骤2：药渣用乙醇提取，得到提取液，

步骤3：提取液经过色谱柱层析得洗脱液。

步骤4：用制备液相色谱梯度洗脱得到的洗脱液，流动相为水和乙腈，收集21.2-24.7分钟洗脱液得到有效组分(或称为B05)。

其中步骤1中所述乙酸乙酯和乙醇的混合物，两者的比例为乙酸乙酯∶乙醇＝1-5∶1-5，优选为乙酸乙酯∶乙醇＝1-2∶1-2，最优选为乙酸乙酯∶乙醇＝1∶1。

所述步骤中，步骤1具体为：取喜树果药材，以乙酸乙酯∶乙醇＝1-5∶1-5为溶剂，回流提取，将提取液与药渣分离，

步骤2具体为：药渣用50-90％的乙醇提取，得到提取液，

步骤2具体为：所述经过色谱柱层析是用5％甲醇溶解上样，过ODS-C18柱，首先，采用5％甲醇作为流动相，然后改换60％甲醇作为流动相，得洗脱液，

步骤4具体为：用制备液相色谱继续分离得到的洗脱液，流动相为水-A和乙腈-B，进行梯度洗脱，所述梯度洗脱程序如下：

流速为10ml/min，柱温为室温；样品用100％乙醇溶解，经制备液相色谱分离，在时间段21.2-24.7分钟收集溶液，溶液经浓缩干燥后得到有效组分。

本发明优选的喜树果有效组分制备方法，包括下列步骤：喜树果粉碎，加入6-10倍量乙酸乙酯∶乙醇＝1∶1，加热回流1-2小时，提取1-3次，药渣加入6-10倍量50-90％乙醇，加热回流，滤液合并得提取液，将提取液浓缩后，用5％甲醇溶解上样，过ODS-C18柱，首先，采用5％甲醇作为流动相，然后改换60％甲醇作为流动相，得洗脱液，用制备液相色谱继续分离洗脱液，分离条件为：色谱柱为Agilent制备柱(Zorbax SB-C18；21.2mm×250mm)，流动相为水A和乙腈B，梯度洗脱程序如下：

流速为10ml/min，柱温为室温；样品用100％乙醇溶解，经制备液相色谱分离，在时间段21.2-24.7分钟收集溶液，溶液经浓缩干燥后得到有效组分。

本发明最优选的喜树果有效组分制备方法，包括下列步骤：