[发明专利]从蛹虫草中提取精制虫草素和虫草多糖的方法

说明书

一、技术领域：

本发明涉及一种从蛹虫草中提取精制虫草素和虫草多糖的方法，属于医药保健、化工领域。总体上涉及物质的提取、分离，更具体地讲，本发明涉及一种从蛹虫草中提取精制虫草素和虫草多糖的方法。

二、背景技术：

蛹虫草是一种名贵的中药材，性平味甘，具有滋肺补肾、止血化痰的功效。近年来的研究结果表明，蛹虫草是冬虫夏草的重要人工替代品之一，其在降血脂，防治动脉硬化，保护心、脑组织，镇静催眠，增强巨噬细胞活性，抗癌、抗炎、抗菌、抗缺氧等方面具有良好功效。蛹虫草的功能性成分、药理药效作用与天然冬虫夏草基本一致，其子实体富含虫草素和虫草多糖等重要的生理活性成分。据现代科学论证：虫草素是一种具有抗菌活性的核苷类物质，对多聚腺苷酸聚合酶有很强的抑制作用，能抑制癌细胞的生长，并有降血糖的作用；虫草多糖是一种高度分枝的半乳甘露聚糖，它能促进淋巴细胞转化，提高血清IgG的抗体含量和机体的免疫功能，增强机体自身抗癌抑癌的能力。

目前，根据国内外公开专利报道，提取精制虫草素和虫草多糖的方法主要有水煮法、醇提法、超临界CO₂萃取法等。中国专利CN1339440报道了以食用真菌虫草或北虫草人工培养后的发酵物为原料，采用超临界技术萃取有效成分，同时结合常规方法除去杂质、浓缩、结晶获得虫草素。较之于传统的浸提法，超临界CO₂萃取克服了前者提取时间长、温度高、系统开放的缺点，可萃取出较多的极性组分，可以更加真实、全面的反映药材的化学组份，但由于超临界CO₂萃取技术用于虫草素提取阶段成本过高，难以进行大规模实践。中国专利CN1560085A公开了一种利用虫草人工培养中产生的培养基下脚料提取虫草多糖的工艺，该法可变废为宝，减少资源的浪费，提高经济效益，但是在多糖制备过程中使用了氯仿等有机溶剂，不利于食品安全。目前有关蛹虫草活性成分综合提取精制方面的专利还未见报道，现有提取技术多是单一的或间歇的，往往通过一套系统单纯提取虫草素或虫草多糖，这样非连续性的提取技术不便于工业化生产；另外，由于提取分离步骤太多，使得现有技术提取的有效成分总含量不高，造成资源极大的浪费。

三、发明内容：

技术问题本发明主要克服现有技术的不足，提供一种低成本，并且对环境污染小的虫草素和虫草多糖的精制方法，目的是使虫草素和虫草多糖能同时被提取、避免单一提取给蛹虫草活性成分带来的损失，以提高蛹虫草综合利用度，降低投资和运行成本，最大价值的发挥蛹虫草的综合经济效益。

技术方案

一种从蛹虫草中提取精制虫草素和虫草多糖的方法，包括如下步骤：

(1)将蛹虫草子实体粉碎过40～60目筛；

(2)向粉碎的原料中加入95％乙醇或无水乙醇以冷渗法进行提取，蛹虫草粉和95％乙醇或无水乙醇的混合比例按重量计为1∶5-20，将醇溶性色素之类的杂质以滤液的形式初步分离出来；

(3)弃滤液，将滤渣回收于55℃真空烘干；

(4)将烘干后的滤渣与乙醇混合，蛹虫草粉和10-30％乙醇的混合比例按重量计为1∶15-40，进行超声波辅助提取，超声波频率为20-40KHz，超声处理时间为30-90分钟，重复处理1-3次，其中乙醇浓度为10-30％；提取结束后，过滤，合并多次滤液，在35-45℃，300-700mmHg下减压浓缩，添加95％乙醇或无水乙醇，使溶液中乙醇重量含量为55-90％，静置8-24小时，使水溶性蛹虫草粗多糖析出；

(5)取醇析后的上清液，在35-45℃，300-700mmHg下减压浓缩至干，向其中加蒸馏水溶解，调pH值至3.0-4.0，上离子交换柱用0.1-0.3mol/L氨水洗脱除掉杂质，收集洗脱液进行再浓缩，冷藏析出晶体，用正丁醇重结晶，得到精制虫草素；

(6)收集第(4)步沉淀出的水溶性蛹虫草粗多糖，在50-60℃下将之烘干；

(7)向烘干的蛹虫草粗多糖中加入20-25倍体积蒸馏水溶解，加入木瓜蛋白酶进行脱蛋白处理，木瓜蛋白酶在提取溶液中重量含量为1.5-3.0‰，在50-60℃，pH5.5-6.5条件下水解4-6小时，离心去除沉淀得二次上清液，将二次上清液浓缩，上大孔树脂柱床，用蒸馏水洗脱至流出液呈无色透明，合并流出液，浓缩，加入95％乙醇或无水乙醇，使得溶液中乙醇重量含量达到55-90％，沉淀出多糖，经冷冻干燥后得到精制蛹虫草多糖。