[发明专利]一种动物细胞培养方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种细胞培养方法，尤其是一种动物细胞的培养方法。 

背景技术

现有的动物细胞培养方法中，一般必须使用终浓度至少10体积％的动物血清，才能保证细胞的正常生长传代。 

然而动物血清是成分不明确的复杂混合物。一方面动物血清含有例如，携带激素、矿物质、微量元素、脂类物质的转运蛋白；细胞贴壁因子和扩散因子等可以促进细胞生长、稳定解毒、维持培养基的pH值，并抑制蛋白酶直接或间接的酶解。但另一方面，动物血清存在很多问题例如，添加及补充过程中导致培养基pH值变化大，存储过程中易受其他微生物污染，低温贮存解冻后易产生沉淀，不同批次差异大，成本高，以及难以从细胞下游产品中去除、安全性差等。 

因此存在动物细胞培养中尽量不用或少用动物血清的趋势。现有技术一般通过额外添加胰岛素、重组胰岛素、人源转铁蛋白、牛血清白蛋白、细胞因子、生长因子等重组蛋白和动物来源成分，来降低使用动物血清的量，例如CN1723277中公开了一种源自肌肉组织的祖细胞/干细胞的培养基组合物，该组合物中添加了胰岛素、FGF型生长因子，通过使用这样的培养基组合物的培养方法，可以降低人血清的使用量。但是重组蛋白和动物来源成分对生物制品(比如疫苗)的安全性有很大影响，比如重组蛋白和动物来源成分引起过敏反应等。 

综上，一种新的动物细胞培养方法，可以使用终浓度小于10体积％的动物血清，就能促进动物细胞生长。 

发明内容

本发明的目的是克服现有动物细胞培养方法中必须使用高含量动物血清(比如，终浓度至少10体积％的动物血清)，才能促进动物细胞生长、安全性差的缺点，提供一种新的动物细胞培养方法，该方法使用低含量的动物血清浓 度就能促进动物细胞生长、安全性好。 

本发明的发明人意外地发现，在动物细胞培养时，将动物细胞培养基按照表1的组分和含量范围进行调整，则可仅使用低含量动物血清(终浓度1至小于10体积％)，就能达到同时使用重组蛋白、动物来源成分和低含量动物血清(终浓度1体积％至小于10体积％)、或者使用高含量动物血清的同样的促进细胞生长作用。 

本发明提供了一种动物细胞培养方法，该方法包括将动物细胞接种到细胞培养基中培养，其中，所述细胞培养基含有终浓度1至小于10体积％的动物血清，每升所述细胞培养基包括下表1所示的组分： 

表1