[发明专利]用于制备治疗耐药结核病的结核杆菌基因疫苗

说明书

技术领域

本发明涉及用于制备治疗耐药结核病的结核杆菌基因疫苗。

背景技术

至今结核病仍然是全球感染性疾病的第一“杀手”，主要原因是卡介苗不能 有效地预防成人肺结核，结核菌耐药问题越来越严重，艾滋病、移民和贫困等社 会问题使得结核病在一些发达国家开始回升。世界卫生组织(WHO)报告全球现有 结核病人2000万，每年新增结核病人800-1000万，每年200-300万人死于结 核病。我国的结核病疫情和耐药情况都相当严重，结核病人数位居世界第二，仅 次于印度。2000年第四次全国结核病流行病学抽样调查结果表明，我国有5.5亿 人感染了结核菌，现有肺结核病人451万，每年死亡人数约13万，位于全国各 种传染病之首。耐药结核病人多，结核分枝杆菌总耐药率为27.8％，其中初始耐 药率为18.6％，获得性耐药率为46.5％，耐多药率为10.7％。结核病是一种在 感染、免疫、预防和治疗等方面充满矛盾和挑战的慢性传染病，合理、规律的化 疗一般在1～2个月内即可杀死病灶内绝大多数结核菌，但仍有少量菌残留，尤 其是寄生于巨噬细胞内的结核菌不易被杀死，需继续治疗3～4个月，甚至更长 时间。由于耐多药结核病的流行、化疗药物的毒副作用，以及人类免疫缺陷病毒 的感染、免疫抑制剂的使用和老年性结核病等原因引起的机体免疫功能低下，使 难治性结核病增多，抗结核治疗面临巨大的挑战，尤其是耐多药结核病(MDR- TB)、广泛耐药结核病(XDR-TB)面临无药可治的困难局面，使我国的结核病疫情 的控制并不十分理想，结核病人数、发病人数、死亡人数均位于全国各种传染病 之首。因此，研制新的抗结核制剂势在必行。

由于研制新的抗结核药物，不仅投入大，周期长，比新的治疗性疫苗的研制 更困难，而且新药也可能很快产生耐药性。而疫苗治疗在几个月中只注射几针， 远比每天服药方便，且副作用较少，费用低。因此，近年来通过免疫调节治疗结 核病成为研究的热点之一，治疗性疫苗的研究与开发成为一个十分重要的研究方 向。

治疗性疫苗的应用对象与预防性疫苗不同，前者用于结核菌感染者或结核病 患者，而后者用于正常人群。有效的预防性疫苗并不一定能用作治疗性疫苗，如 研究证明卡介苗用于治疗效果不理想。抗结核免疫主要是细胞介导的免疫反应， 疫苗治疗可以通过调节或选择性地诱导结核病患者免疫系统蕴藏的潜力，来达到 治疗疾病的目的。

目前用于结核病辅助治疗的免疫调节剂主要有二类：一类是非特异性的细胞 因子如IFN-γ、IL-2等，半衰期短，需反复注射，费用高。另一类是特异性的免 疫调节剂：(1)母牛分枝杆菌菌苗(商品名微卡菌苗)：由安徽龙科马生物制药 有限公司生产，是母牛分枝杆菌经高温灭活纯化后制成的无细胞免疫调节剂，其 活性成分以细胞壁为主，还有以蛋白质为主的细胞因子诱导物质，及具有较强免 疫活性的DNA聚合体。II、III期临床研究结果表明微卡菌苗能增强肺结核患者 的细胞免疫功能，与化疗联用能加快痰菌阴转、病灶吸收及空洞缩小关闭的速度， 缩短短程化疗疗程。其不良反应少且较轻微，使用安全，复发率低。目前该菌苗 已在临床应用，作为肺结核的免疫治疗和短程化疗的辅助治疗。(2)草分枝杆菌 制剂(商品名乌体林斯utilin’s)：由成都金星健康药业有限公司研制，是灭活 的草分枝杆菌制成的免疫调节剂，可显著提高肺结核患者的细胞免疫功能，促进 肺结核病灶的吸收好转。(3)卡介苗多糖核酸注射液(商品名斯奇康)：由长沙 九芝堂生产，是采用热酚法去掉了卡介苗菌体可诱导迟发型超敏反应的菌体蛋白 质，再用乙醇沉淀提取免疫活性较强的菌体脂多糖成分，然后制成灭菌生理盐水 溶液，可增强肺结核患者的细胞免疫和体液免疫功能，显著增强机体内T淋巴细 胞和自然杀伤细胞功能，提高IL-2、IL-2受体的表达和IFN-γ的诱生水平，促进 细菌阴转和结核病灶的吸收好转，提高了联合化疗的疗效。这三种疫苗都是死疫 苗，只能诱导体液免疫和Th1型细胞免疫应答，不能诱导特异性细胞毒性T淋巴 细胞(CTL)应答。

目前国内外尚未见应用核酸疫苗治疗耐药结核病的研究报道。如何应用核酸 疫苗治疗耐药结核病就成为该技术领域急需要解决的技术难题。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于制备治疗耐药结核病的结核杆菌基因疫苗。

本发明的上述目的是通过以下技术方案达到的：