[发明专利]确定核酸浓度的方法有效
| 申请号: | 200710110070.2 | 申请日: | 2007-06-14 |
| 公开(公告)号: | CN101089196A | 公开(公告)日: | 2007-12-19 |
| 发明(设计)人: | 沃尔特·冈布雷赫特;乔恩·莫斯纳;塞巴斯蒂安·施米特 | 申请(专利权)人: | 西门子公司 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/25;G01N27/00;G01N21/64;G01R19/00 |
| 代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 | 代理人: | 邵亚丽;李晓舒 |
| 地址: | 德国*** | 国省代码: | 德国;DE |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 确定 核酸 浓度 方法 | ||
1.一种确定微流体装置中的试样中的核酸浓度的方法,具有以下步骤:
a)将试样引入第一室;
b)实施可周期性实施的放大反应,以对预定的周期数放大核酸;
c)将作为该第一室的容积的一部分并具有放大的核酸的特定容积引入第二室,并在第一室中用未使用过的用于该放大反应的反应剂来替代该引入的特定容积;
d)确定在具有用于确定浓度的装置的第二室中放大的核酸的浓度;以及
e)重复步骤b)–d),直至在该第二室中所确定的放大的核酸的浓度处于预定的浓度范围内,
其中,所述预定的浓度范围是所述用于确定浓度的装置的测量范围。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,所述用于确定浓度的装置包括具有用于结合所述放大的核酸的特定于位置的稳定的捕获寡核苷酸的微阵列。
3.根据权利要求2所述的方法,其中,利用标记来确定所结合的放大核酸的浓度。
4.根据权利要求3所述的方法,其中,所述标记是光学标记。
5.根据权利要求3所述的方法,其中,所述标记是酶标记。
6.根据权利要求5所述的方法,其中,所述标记是酶反应催化的、可光检测的。
7.根据权利要求5所述的方法,其中,所述标记是酶反应催化的、可电化学检测的。
8.根据权利要求7所述的方法,其中,所述电化学检测是借助氧化还原周期增强的电流测量。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法,其中,为所述试样给定具有已知起始浓度的已知核酸。
10.根据权利要求1至8中任一项所述的方法,其中,借助引入的特定容积与整个试样容积的容积比和/或借助所实施放大周期的数目来计算核酸浓度。
11.根据权利要求1至8中任一项所述的方法,其中,所述放大反应是聚合酶链反应。
12.一种用于实施权利要求1所述的方法的设备,具有微流体装置,该微流体装置具有带有通过周期性实施的放大反应来放大核酸的装置的第一室,和 与该第一室连接可与其进行流体交换、具有用于确定放大的核酸的浓度的装置的第二室,
其特征在于,该设备具有用于将具有用于放大反应的反应剂的溶液的特定容积引入该第一室中并将特定的容积从该第一室中引入该第二室的装置,并且
具有用于控制所述用于将具有用于放大反应的反应剂的溶液的特定容积引入第一室中并将特定的容积从第一室中引入第二室的装置的控制装置,其中,所述控制装置构成为,从所述用于确定浓度的装置接收信号,并根据该信号对所述用于将具有用于放大反应的反应剂的溶液的特定容积引入第一室中并将特定的容积从第一室中引入第二室的装置进行控制,以便为所述第一室供给特定容积的具有用于放大反应的反应剂的溶液以及将相应的特定容积从该第一室引入该第二室中。
13.根据权利要求12所述的设备,其中,所述用于确定浓度的装置包括具有用于检测放大的核酸的特定于位置的稳定的捕获寡核苷酸的微阵列。
14.根据权利要求12所述的设备,其中,所述用于确定浓度的装置包括用于进行光检测的装置。
15.根据权利要求12所述的设备,其中,所述用于确定浓度的装置包括用于进行电化学检测的装置。
16.根据权利要求15所述的设备,其中,所述用于电化学检测的装置设计为用于测量电流和/或电势。
17.根据权利要求12所述的设备,其中,所述借助于周期性实施的放大反应来放大核酸的装置包括用于加热和/或冷却的装置。
18.根据权利要求17所述的设备,其中,所述控制装置还为第一室的用于加热和/或冷却的装置预先给定温度特性。
19.根据权利要求12至18中任一项所述的设备,还具有计算机,用于根据用于确定浓度的装置的信号来计算试样中核酸的浓度。
20.根据权利要求12至18中任一项所述的设备,其中,设有至少一个用于确定核酸浓度的反应剂的存储池,其与所述第二室连接以进行流体交换。
21.根据权利要求20所述的设备,其中,所述存储池包含酶标记。
22.根据权利要求20所述的设备,其中,所述存储池包含酶底物。
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