[发明专利]具有抗血管生成作用的融合蛋白及其编码基因与应用

权利要求书

1、具有抗血管生成作用的融合蛋白，是具有下述氨基酸残基序列之一的蛋白质：

1)序列表中的SEQ ID NO：1；

2)序列表中的SEQ ID NO：2；

3)序列表中的SEQ ID NO：3；

4)将序列表中SEQ ID NO：1-3的氨基酸残基序列经过一至十个氨基酸残基的取代、缺失或添加且具有抗血管生成作用的蛋白质。

2、根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于：所述融合蛋白具有序列表中SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：3的氨基酸残基序列。

3、编码权利要求1所述的具有抗血管生成作用的融合蛋白的基因，是下述核苷酸序列之一：

1)序列表中SEQ ID NO：4的DNA序列；

2)序列表中SEQ ID NO：5的DNA序列；

3)序列表中SEQ ID NO：6的DNA序列；

4)编码序列表中SEQ ID NO：1-3的DNA序列；

5)与序列表中SEQ ID NO：4-6限定的DNA序列具有90％以上同源性且具有抗血管生成作用的核苷酸序列；

6)在高严谨条件下可与序列表中的SEQ ID NO：4-6限定的DNA序列杂交的核苷酸序列。

4、根据权利要求3所述的基因，其特征在于：所述基因具有序列表中SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5或SEQ ID NO：6的DNA序列。

5、含有权利要求3或4所述基因的表达载体、转基因细胞系和宿主菌。

6、一种表达权利要求1所述的具有抗血管生成作用的融合蛋白的方法，是将含有权利要求3所述的具有抗血管生成作用的融合蛋白编码基因的重组表达载体导入宿主细胞，表达得到具有抗血管生成作用的融合蛋白。

7、根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述重组表达载体中具有抗血管生成作用融合蛋白编码基因的5’端连接有酵母分泌信号序列；所述酵母分泌信号序列具有序列表中SEQ ID NO：7的核苷酸序列。

8、根据权利要求6所述的方法，其特征在于：用于构建所述重组表达载体的出发载体为pPIC9、pPIC6α、pPIC3、pHIL-D1、pA0804、pA0815、pPSC3K或pPIC9K；所述宿主为酵母菌、大肠杆菌、哺乳动物细胞、昆虫细胞或枯草杆菌；所述酵母菌为巴氏毕赤酵母GS115、KM71或SMD1168；所述大肠杆菌为E.coli JM109、E.coliHB101或E.coli Top10。

9、根据权利要求8所述的方法，其特征在于：所述重组酵母表达载体为Endo-Albu/pPIC9或Endo-Albu/pPIC9/9K。

10、权利要求1所述的融合蛋白在制备抑制血管生成和/或肿瘤治疗性药物中的应用。