[发明专利]放射性核素99锝m标记嗜酸乳杆菌的制备方法

说明书

技术领域

本发明是采用放射性核素⁹⁹锝^m(⁹⁹Tc^m)标记嗜酸乳杆菌(LactobacillusAcidophilus)的一种放射性核素⁹⁹锝^m标记嗜酸乳杆菌的制备方法。涉及医学的配制品和配制药品技术领域。

背景技术

在医学领域，广泛应用放射性药物示踪技术诊断、治疗、研究疾病。目前应用的放射性核素⁹⁹锝^m(⁹⁹Tc^m)标记的药物从制备角度可分为三类：

1.⁹⁹锝^m(⁹⁹Tc^m)络合物2.⁹⁹锝^m(⁹⁹Tc^m)标记蛋白3.⁹⁹锝^m(⁹⁹Tc^m)标记胶体[实验核医学与核药学(第五章放射性药物、第二节放射性锝标记药物)第100页]。放射性药物基本都是通过静脉给药，也有采用直接口服法的，而直接口服法又有被胃黏膜部分吸收的缺点，并且所有细菌的检查和研究均在体外进行。因此，研究和检测的效果欠佳。

发明内容

本发明的目的是发明一种适合人和动物在生理状态下、无创、体内研究和检测胃肠道放射性药物的放射性核素⁹⁹锝^m标记嗜酸乳杆菌的制备方法。

本发明的技术方案是：

在超净台内，用MRS培养基，在37℃厌氧条件下，将真空冷冻干燥嗜酸乳杆菌种复苏，经两次传代后，再用LbS选择性培养基37℃厌氧培养多天；收集嗜酸乳杆菌；取盐水，注入PYP瓶内，摇匀，将瓶内液体取出，再注入第二瓶PYP中，根据需要可一直注入到第五瓶，甚至更多瓶中；

将最终的液体取出，注入到盛细菌的瓶内，摇匀；

将盛细菌瓶放置于培养箱或温箱中孵育；

将瓶取出，用盐水冲洗，离心机离心；再冲洗，再离心多次；

弃上清液，加入新鲜至多天内淋洗的⁹⁹Tc^mO^-₄液0.1～1000mci或更大的放射性活度到盛沉淀的乳杆菌瓶内；放置于培养箱或温箱中孵育；

重复上述冲洗、离心多次；弃上清液，沉淀部分用放射性活度计测量后，即可使用。

具体是：在超净台内，用MRS培养基，在37℃厌氧条件下，将真空冷冻干燥嗜酸乳杆菌种复苏，经两次传代后，再用LbS选择性培养基37℃厌氧培养多天；收集嗜酸乳杆菌，取pH0.1～6.0盐水0.5～5.0ml，注入PYP瓶内，摇匀，将瓶内液体取出，再注入第二瓶PYP中，根据需要可一直注入到第五瓶，甚至更多瓶中；

将最终的液体取出，注入到盛细菌的瓶内，摇匀；

将盛细菌瓶放置于1℃～65℃的培养箱或温箱中孵育1min～60min；

将瓶取出，用pH0.1～6.0盐水0.5～5.0ml冲洗，离心机以100～4500转/min离心0.1min～20min；再冲洗，再离心多次；

弃上清液，加入新鲜至多天内淋洗的⁹⁹Tc^mO₄液0.1～1000mci或更大的放射性活度到盛沉淀的乳杆菌瓶内，总体积1～10ml或更大；放置于1℃～65℃的培养箱或温箱中孵育1min～60min；

重复上述冲洗、离心多次；弃上清液，沉淀部分用放射性活度计测量后，即可使用。

其中所采用的真空冷冻干燥嗜酸乳杆菌种，其菌种编号为1.1845，保藏编号为ADGA-A，由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)提供。

所采用的MRS培养基按CGMCC提供的具有以下组成：在总重量为100中，蛋白胨占0.93％，牛肉提取物占0.93％，酵母提取物占0.465％，葡萄糖占0.465％，乙酸钠占0.465％，柠檬酸二胺占0.186％，Tween 80占0.093％，K2HPO4占0.186％，MgSO4·7H2O占0.186％，MnSO4·H2O占0.00465％，CaCO3占1.86％，琼脂占1.395％，蒸馏水占92.57％，pH6.8。