[发明专利]一种从中药桑叶提取液中分离桑叶总生物碱的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药有效成分的提取分离方法，特别是涉及一种从中药桑叶提取液中提取分离桑叶总生物碱的方法，属中药领域。

背景技术

生物碱是自然界中广泛存在的一大类碱性含氮化合物，是许多中草药的有效成分，是自然界中存在的一类重要物质。桑叶系桑科植物桑Morus alba L.的干燥叶，应符合中国药典2005年版一部桑叶项下的各项规定。桑叶为一种常用的民间中草药，具有疏散风热、清肺润燥、平肝明目等功效。研究表明，桑叶总碱是其主要有效部位，其主要成分有胡芦巴碱(trigonellinelline)、脱氧野尻霉素(1-Deoxynojirimycin Hydrochloride)、胆碱、腺嘌呤等。临床制剂已用于降血糖、改善糖耐量等。因此，桑叶总生物碱具有广阔的应用前景。

现阶段，中药生物碱的提取工艺已较成熟，根据生物碱的理化特性，采用适宜的溶剂如水、酸水、酸醇及碱醇等，利用浸渍、渗漉、煎煮、回流、超声、酶解等技术将生物碱类成分提取出来，提取率能达到90％以上。但由于生物碱在中药中的相对含量较低(多数含量为0.01％-1％)，提取时势必引入大量的其他药物成分和杂质类成分，要保证最后制剂的安全有效，必须对其进行精制纯化，制备成有效部位甚至有效成分来应用，因此生物碱有效部位的精制纯化技术就显得十分重要。但由于其他多种成分的并存以及淀粉、树胶、果胶、粘液质、色素等杂质的干扰，生物碱有效部位的精制技术一直是中药现代化的“瓶颈”，严重影响了现代中药制剂对三效(高效、速效、长效)、三小(剂量小、毒性小、副作用小)、五方便(生产、运输、携带、贮存、应用方便)的要求。

虽然在教科书及各种文献中多有提取分离中药总生物碱的方法，但这些方法仅停留于实验室的研究水平，多数是将含有生物碱的溶液过柱后，以氨液或NaOH溶液洗脱，收集洗脱液后再以有机溶剂萃取生物碱；或者将上过样品的树脂以碱液浸泡，然后再用有机溶剂回流提取生物碱。但这些方法具有步骤繁琐，有机溶剂用量大、大设备无法实现和生物碱转移率低等缺点，因而一直处在实验室研究水平，不能在大生产中应用。在中国专利申请CN03101988.9中提出了一种最新的从中药桑叶中提取分离总生物碱的技术是用离子交换树脂法，基本过程为：将桑叶药材经常规提取得提取液，酸化后加入絮凝剂，静置后的上清液通过强酸型(氢型)阳离子交换树脂柱，用水洗脱至无色，倒出树脂，加入碱液闷润4h，然后以乙醇等溶剂回流提取，减压浓缩干燥得桑叶总生物碱。试验中可以发现该方法虽可以提高生物碱的纯度和转移率，具有一定的进步性，但是仍存在严重缺陷：使用了大量的甲醇、乙醇等有毒性有机溶剂，给生产操作以及最后制剂的安全性带来了隐患；碱性条件下游离的桑叶生物碱需要在乙醇溶液中才有较好的溶解度，但乙醇溶液的使用，会在洗脱液中带入树脂单体成分苯乙烯、二乙烯苯等的残留，影响制剂安全；操作中需要将树脂倒出，然后用有机溶剂回流，工艺繁琐，可操作性差；同时由于工艺中使用乙醇，还要求树脂前处理必须增加乙醇处理步骤，后期还要回收乙醇，增加了工艺步骤，提高了生产成本。故为了适应市场及生产，需要一种安全、低成本、收率高的提取分离方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种安全、低成本、高效率的提取分离桑叶总生物碱的方法。

该发明目的是通过如下工艺实现的：取桑叶提取液，调整pH值1至7，滤过，取滤液加于阳离子交换树脂柱上，先以水洗脱除杂，再用0.5％～15％酸液洗脱，收集洗脱液，加碱中和，经脱盐处理，即得桑叶总生物碱。

在上述工艺过程中，将含有总生物碱的提取液调至合适的酸度后，生物碱电离成为阳离子，非碱性物质不被电离，提取液过阳离子交换树脂柱后，电离的生物碱有机离子与树脂柱上的氢离子交换而被牢固地吸附于树脂柱上。这里提取液的pH值不宜过高或过低，如果过高，提取液呈中性或碱性，生物碱不能电离，也就不能完成树脂上的交换过程；如果过低，提取液中的氢离子浓度太高，阻碍了树脂柱上的氢离子解离，同样不能很好地完成树脂交换过程，因而实验中发现调整提取液的pH值为1至7是比较合适的。以水洗脱时，使用的是去离子水，以确保不引入新的离子干扰，洗脱时那些没有被树脂吸附的非碱性物质就很容易被水洗脱下来，从而与被吸附在树脂柱上生物碱有机离子分离了。此后再加较高浓度的酸液进行洗脱，由于此时酸液中的氢离子浓度很高，就会竞争性地与树脂相结合，从而将吸附在树脂柱上的生物碱有机离子交换下来，溶解在酸洗脱液中，流出树脂柱，完成生物碱的富集过程。之后，在洗脱液中加入碱中和掉多余的酸，再经常规脱盐处理，即可得到纯度较高的桑叶总生物碱了。