[发明专利]一种从中药石斛提取液中分离石斛总生物碱的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药有效成分的提取分离方法，特别是涉及一种从中药石斛提取液中提取分离石斛总生物碱的方法，属中药领域。

背景技术

生物碱是自然界中广泛存在的一大类碱性含氮化合物，是许多中草药的有效成分，是自然界中存在的一类重要物质。石斛，又名石斛兰，收载于中国药典2005年版一部62页，系兰科植物金钗石斛Dendrobium nobile Lindl.、铁皮石斛Dendrobium candidum Wall.exLindl.、马鞭斛Dendrobium fimbriatum Hook.var.oculatum Hook.及其近似种的新鲜或干燥茎。石斛是一种常用民间中草药，性甘、微寒，具有益胃生津、滋阴清热等功效。研究表明，石斛总生物碱是其主要有效部位，虽然不同的品种石斛生物碱含量有差异，但所含成分大致相似，主要包括石斛碱(Dendrobine)、石斛次碱(Nobilonine)、6-羟基石斛碱(6-Hydroxydendrobine)等。临床治剂已用于阴伤津亏、口干烦渴、食少干呕等症的治疗。因此，石斛总生物碱有效部位制剂临床需求量很大。

现阶段，中药生物碱的提取工艺已较成熟，根据生物碱的理化特性，采用适宜的溶剂如水、酸水、酸醇及碱醇等，利用浸渍、渗漉、煎煮、回流、超声、酶解等技术将生物碱类成分提取出来，提取率能达到90％以上。但由于生物碱在中药中的相对含量较低(多数含量为0.01％～1％)，提取时势必引入大量的其他药物成分和杂质类成分，要保证最后制剂的安全有效，必须对其进行精制纯化，制备成有效部位甚至有效成分来应用，因此生物碱有效部位的精制纯化技术就显得十分重要。但由于其他多种成分的并存以及淀粉、树胶、果胶、粘液质、色素等杂质的干扰，生物碱有效部位的精制技术一直是中药现代化的“瓶颈”，严重影响了现代中药制剂对三效(高效、速效、长效)、三小(剂量小、毒性小、副作用小)、五方便(生产、运输、携带、贮存、应用方便)的要求。

虽然在教科书及各种文献中多有提取分离中药总生物碱的方法，但这些方法仅停留于实验室的研究水平，多数是将含有生物碱的溶液过柱后，以氨液或NaOH溶液洗脱，收集洗脱液后再以有机溶剂萃取生物碱；或者将上过样品的树脂以碱液浸泡，然后再用有机溶剂回流提取生物碱。但这些方法具有步骤繁琐、有机溶剂用量大、大设备无法实现和生物碱转移率低等缺点，因而一直是实验室研究水平，不能在大生产中应用。在中国专利申请CN03121199.2中提出的从中药金钗石斛中提取分离总生物碱的几种方法中涉及到离子交换树脂法，基本过程为：将金钗石斛药材经常规提取得到的酸性药液，通过阳离子交换树脂柱富集，用醇水混合溶剂洗除杂质，然后用氨水醇溶剂洗脱，收集洗脱液，浓缩洗脱液得金钗石斛总生物碱。这种方法避免了大量有机溶剂的使用，具有一定的进步，但仍存在严重缺陷：试验中可以发现该方法虽可以提高生物碱的纯度，但转移率仍然不高；碱性条件下游离的金钗石斛总生物碱需要在乙醇溶液中才有较好的溶解度，但乙醇溶液的使用，会在洗脱液中带入树脂单体成分苯乙烯、二乙烯苯等的残留，影响制剂安全；同时由于工艺中使用乙醇，还要求树脂前处理必须增加乙醇处理步骤，后期还要回收乙醇，增加了工艺步骤，提高了生产成本。故为了适应市场及生产需求，迫切需要一种安全、低成本、收率高的提取分离方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种安全、低成本、高效率的提取分离石斛总生物碱的方法。

该发明目的是通过如下工艺实现的：取石斛提取液，调整pH值1至7，滤过，取滤液加于阳离子交换树脂柱上，先以水洗脱除杂，再用0.5％～15％酸液洗脱，收集洗脱液，加碱中和，经脱盐处理，即得石斛总生物碱。