[发明专利]胆色素结石豚鼠动物模型的构建方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种动物模型的构建方法，尤其是涉及一种胆色素结石豚鼠动物模型的构建方法。

技术背景

胆石症是一种严重危害人类健康的常见病，胆石症可发生于胆囊、肝内胆管和胆总管。胆结石临床大致可分为胆固醇结石和胆色素结石。

现今，人们一般通过构建胆石症动物模型，运用科学方法，通过研究模型动物从而寻找胆石症的病因，预防胆石形成、结石携带症状发作和胆石清除后复发，从根本上寻找防治胆石病彻底有效的办法。

致石饲料所致豚鼠胆结石模型造模方法为：体重250-300g豚鼠，以致石饲料喂养6周。实验期间，不限饮食。一般该模型成石率为80％左右，豚鼠死亡率近60％，形成结石外形不规则，呈棕黑色泥沙样或棕色絮状沉淀(朱培庭等，升清胶囊对豚鼠胆石病相关基因的影响，中西医结合学报，2005年5月第3卷第3期)。致石饲料配方：正常饲料45.43g，致石性药物4.57g(其中酪蛋白1g、蔗糖1.5g、猪油1g、微晶纤维素1g、胆酸0.2g、胆固醇0.05g)。

一般林可霉素诱导豚鼠胆色素结石模型方法为：体重450-500g豚鼠，以盐酸林可霉素60mg/kg/天剂量大腿根部皮下注射7天。实验期间，不限饮食。实验期间使用普通饲料喂饲(侯中伟，大柴胡汤加减冲剂防治豚鼠胆红素结石模型的实验研究，中国学位论文全文数据库)。一般该模型所形成的结石大小不一，形状不规则，多为白色絮状沉淀，亦有砂石样沉淀。

上述2种方法存在一定的问题，一是造模时间长(6周)且死亡率过高(近60％)，二是形成多为白色絮状沉淀，相对较少形成泥沙样沉淀，因此，造模成功率相对较低。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提出一种能减少造模时间并能提高造模成功率的胆色素结石豚鼠动物模型的构建方法。

本发明的技术方案是在林可霉素诱导胆色素结石形成过程中使用致石饲料替代普通饲料。具体构建方法是：选取体重为300-600g的豚鼠，用盐酸林可霉素以6-600mg/kg/天的剂量在豚鼠的大腿根部皮下注射3-6天，造模期间以致石饲料喂养豚鼠。

本发明在造模时使用的致石饲料最好由通常饲料4.5-450份和致石性药物0.45-45份构成，所使用的致石性药物的组成和含量最好为：酪蛋白0.1-10份、蔗糖0.15-15份、猪油0.1-10份、微晶纤维素0.1-10份、胆酸0.002-0.2份、胆固醇0.005-0.5份。

本发明在造模时选取的豚鼠最好为普通级雄性豚鼠。

相对现有技术，本发明动物模型的构建方法安全可靠，减少了豚鼠胆色素模型造模时间、提高造模成功率和造模效率，具有良好的应用前景。

附图说明

图1是本发明实施例1之胆色素结石豚鼠动物模型豚鼠胆囊状况对比图。

图2是本发明实施例2之胆色素结石豚鼠动物模型豚鼠胆囊状况对比图。

图3是本发明实施例3之胆色素结石豚鼠动物模型豚鼠胆囊状况对比图。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本发明作进一步详细说明。

实施例1

1、材料和方法

1.1 药品及试剂

盐酸林可霉素(SPECTINOMYCIND lincomycin hydrochloride)，注射液，上海禾丰制药有限公司生产；豚鼠饲料及豚鼠致石饲料，上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，每份致石饲料含：正常饲料45.43g和致石性药物4.57g(致石性药物中含：酪蛋白1g、蔗糖1.5g、猪油1g、微晶纤维素1g、胆酸0.2g、胆固醇0.05g)。

1.2 实验动物

普通级雄性豚鼠(guinea-pig)，购自上海市奉贤县泰日镇银根养兔室，体重450±50g。

2、动物模型的构建

雄性豚鼠24只，随机分为正常对照组、胆色素结石模型组1，胆色素结石模型组2，每组8只。

正常对照组用以生理盐水60mg/kg/天剂量大腿根部皮下注射连续7天。

模型组1用以盐酸林可霉素60mg/kg/day剂量大腿根部皮下注射造模5天，第6天起用以生理盐水60mg/kg/天剂量大腿根部皮下注射2天；

模型组2用以盐酸林可霉素60mg/kg/天剂量大腿根部皮下注射造模7天，同时实验期间，模型组1喂以致石饲料，模型组2喂以普通饲料，其它不限饮食，每日喂以适量青菜。

实验的第8天(即模型组2最后一剂林可霉素后24小时)，戊巴比妥麻醉下完整切下胆囊，观察成石情况，计算各组成石率，如表1所示。术前动物禁食12小时。