[发明专利]新型肽生成酶基因

权利要求书

1.编码选自(I)和(U)的蛋白质的DNA，其中所述蛋白质具有如下定义的氨基酸序列：

(I)由SEQ ID NO：25的26-620位氨基酸残基组成的氨基酸序列，或

(U)由SEQ ID NO：25组成的氨基酸序列。

2.一种包含根据权利要求1的DNA的重组DNA。

3.一种包含根据权利要求2的重组DNA的转化细胞。

4.一种生产肽生成酶的方法，包括：

在培养基中，在适于生产肽生成酶的条件下，培养根据权利要求3的转化细胞一段时期，和

在培养基和/或转化细胞中累积肽生成酶。

5.一种生产二肽的方法，包括：

在培养基中，在适于在培养物中生产肽生成酶的条件下，培养根据权利要求3的转化细胞一段时期，和

将培养物与羧基成分和胺成分混合，通过由所述DNA所编码的肽生成酶所促进的酶催化作用，来合成二肽。

6.根据权利要求5的生产二肽的方法，其中所述细胞是属于鞘氨醇杆菌属的具有由羧基成分和胺成分生成二肽的能力的微生物。

7.根据权利要求5或6的生产二肽的方法，其中所述细胞是从所述培养物中分离的。

8.根据权利要求5或6的生产二肽的方法，其中所述细胞是经处理的微生物细胞产物。

9.编码选自(J)和(V)的蛋白质的DNA，其中所述蛋白质具有如下定义的氨基酸序列：

(J)在SEQ ID NO：25的26-620位氨基酸残基中，置换、缺失、插入、添加，和/或倒位一个或多个氨基酸所得的，且在50℃和pH 8下，具有SEQ ID NO：25的26-620位无突变的氨基酸残基所对应的蛋白质的至少50％的肽生成活性的氨基酸序列，或

(V)成熟蛋白质区，其具有在SEQ ID NO：25的氨基酸序列中，包括置换、缺失、插入、添加，和/或倒位一个或多个氨基酸所得的的氨基酸序列，且其在50℃和pH 8下，具有无突变的SEQ ID NO：25所对应的蛋白质的至少50％的肽生成活性。

10.根据权利要求9的DNA，其中所述多个是2-50个氨基酸残基。

11.一种包含根据权利要求9的DNA的重组DNA。

12.一种包含根据权利要求11的重组DNA的转化细胞。

13.一种生产肽生成酶的方法，包括：

在培养基中，在适于生产肽生成酶的条件下，培养根据权利要求12的转化细胞一段时期，和

在培养基和/或转化细胞中累积肽生成酶。

14.一种生产二肽的方法，包括：

在培养基中，在适于在培养物中生产肽生成酶的条件下，培养根据权利要求12的转化细胞一段时期，和

将培养物与羧基成分和胺成分混合，通过由所述DNA所编码的肽生成酶所促进的酶催化作用，来合成二肽。

15.根据权利要求14的生产二肽的方法，其中所述细胞是属于鞘氨醇杆菌属的具有由羧基成分和胺成分生成二肽的能力的微生物。

16.根据权利要求14或15的生产二肽的方法，其中所述细胞是从所述培养物中分离的。

17.根据权利要求14或15的生产二肽的方法，其中所述细胞是经处理的微生物细胞产物。

18.选自(i)和(u)的DNA，其中所述DNA具有如下定义的碱基序列：

(i)由SEQ ID NO：24的104-1888位碱基组成的碱基序列，或

(u)由SEQ ID NO：24的29-1888位碱基组成的碱基序列。

19.一种包含根据权利要求18的DNA的重组DNA。

20.一种包含根据权利要求19的重组DNA的转化细胞。

21.一种生产肽生成酶的方法，包括：

在培养基中，在适于生产肽生成酶的条件下，培养根据权利要求20的转化细胞一段时期，和

在培养基和/或转化细胞中累积肽生成酶。