[发明专利]Nipah病毒的引物和探针及一步法实时RT－PCR检测试剂盒

权利要求书

1.一组针对Nipah病毒的引物和探针，包括以下序列：

(1)Nipah病毒的上游引物，其序列为SEQ ID NO1；

(2)Nipah病毒的下游引物，其序列为SEQ ID NO2；

(3)Nipah病毒的TaqMan探针，其序列为SEQ ID NO3；

(4)内参RNA的TaqMan探针，其序列为SEQ ID NO4；

或者包含上述序列SEQ ID NO1～SEQ ID NO4的向5’端或/和3’端延长的序列；

或者与上述序列SEQ ID NO1～SEQ ID NO4同源性大于85％的序列；

或者上述序列SEQ ID NO1～SEQ ID NO4的碱基互补序列。

2.一种Nipah病毒一步法实时RT-PCR检测试剂盒，其组成包括：One StepRT-PCR Master Mix、标准品RNA、内参RNA、Primer & Probe Mix、逆转录酶和水；其中所述的Primer & Probe Mix序列为SEQ ID NO1～SEQ ID NO4的混合物。

3.根据权利要求2所述的一种Nipah病毒一步法实时RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所述One StepRT-PCR Master Mix为含RT-PCR缓冲液、Mgcl₂，dNTPs、DNA聚合酶和无RNA酶水的混合液。其中DNA聚合酶为热启动Taq DNA聚合酶。

4.根据权利要求2所述的一种Nipah病毒一步法实时RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所述标准品RNA序列为SEQ ID NO5。

5.根据权利要求2所述的一种Nipah病毒一步法实时RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所述内参RNA序列为SEQ ID NO6。

6.根据权利要求2所述的一种Nipah病毒一步法实时RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，所述水为无RNA酶水。

7.根据权利要求2所述的一种Nipah病毒一步法实时RT-PCR检测试剂盒，其特征在于，试剂盒中各组分的量为：2×One Step RT-PCR Master Mix 1.25ml/管、标准品RNA冻干管(浓度梯度)共6管、内参RNA冻干管1管、5×Primer& Probe Mix 1.0ml/管、逆转录酶MMLV 80ul/管和无RNA酶水10ml/瓶。