[发明专利]抑制癌细胞生长的黄耆发酵液及其发酵方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种抑制癌细胞生长的发酵液及其发酵方法，尤其是一种以蛹虫草菌来发酵黄耆获得的发酵液及其发酵方法。

背景技术

在现今医疗进步的时代，癌症仍然为致死疾病，其特征为过度的细胞分裂所导致的恶性组织的不正常团块。癌症细胞不具有正常细胞生长所受到的限制，会侵入并占领留给其它细胞的正常空间。

癌症的治疗方法包括化学治疗、手术治疗、放射线治疗，以及这些治疗方法的结合。其中，化学治疗通常使用一种或多种可抑制癌细胞生长的化合物。虽然目前已经研发了许多癌症化疗药剂，但仍然需要更有效的化学治疗。

目前，中草药对于抑制癌症的研究已经持续、广泛开展多年。黄耆为多年生豆科草本植物黄蓍的根，种类繁多，主要产于甘肃、陕西、内蒙古、河北、山西等地。其中，以膜荚黄蓍Astragalus membranaceus(Fisch)Bunge和内蒙古黄蓍Astragalus mongholicus Bunge质量较佳。现在，已知黄耆具有多种临床功用，除了增强免疫功能外，还具有促进造血、促进各类血球细胞生长、抗血小板聚集、抗心肌缺血、降低血压、利尿、抗衰老以及护肝、抗发炎、抗菌、抗病毒等多种功能。

黄耆在治疗癌症方面的文献包括：Rittenhouse等学者以会分泌物质抑制巨噬细胞的肿瘤细胞进行研究发现，黄耆水萃取液对肾脏癌细胞Renca、膀胱癌细胞MBT-2具有免疫抑制效果，并可使共培养的巨噬细胞免疫功能恢复。Satonori等学者以致癌药物BBN将小鼠致癌，使其细胞激素分泌、免疫力下降，然后在饲料中添加黄耆萃取物，结果发现：当浓度达到10mg/kg B.W.时，肿瘤的发生率降低为50％，且T细胞(T cell)、NK细胞(Nature killer cell)的活性增强，IL-2、IFN-γ的生成量明显增加。从而表明，黄耆可以通过活化毒杀细胞和细胞激素的产生达到抑制癌症的效果。

此外，目前已知冬虫夏草含有核苷类、固醇类、氨基酸、肽类、甘露醇、糖类、有机酸、无机元素、维生素类、蛋白质以及多胺类等化学成分。Cunningham(1951)等人从蛹虫草的发酵制备物中发现一种成分为3’-deoxyadenosine的核苷抗生素(cordycepin)，并将之称作虫草素。多数学者认为冬虫夏草防治癌症的作用与其增强免疫功能、调节机体免疫系统的相对平衡关系密切，也有学者认为虫草素抑制核酸合成是虫草抗癌的机制，因为蛹虫草本身在直接抑制癌细胞方面具有一定功效。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：通过结合蛹虫草和黄耆，提供一种具有抑制癌细胞生长功能的产物，以及一种获取前述产物的方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种发酵黄耆的方法，其包括：活化蛹虫草菌(Cordyceps militaris)；将蛹虫草菌加入一含黄耆的培养基中进行发酵培养，以获得发酵产物；以及将发酵产物离心处理，取得上清液为发酵液。

本发明还提供了一种由上述方法制得的发酵液，其具有抑制癌细胞生长的功能。

本发明还进一步提供了一种可预防和/或治疗癌症的组合物，其包括有效量按上述方法制得的发酵液和一种药学上可接受的载体(carrier)或赋形剂。

附图说明

为了使本发明的发明目的、特征和优点更加明显易懂，下面将结合附图和具体实施方式，对本发明作进一步详细说明，其中：

图1所示为蛹虫草菌静置发酵黄耆的发酵液对癌细胞的IC₅₀测试结果。

图2a所示为未经发酵的黄耆对癌细胞存活率的影响。

图2b所示为经过发酵的黄耆对癌细胞存活率的影响。

图3a-c所示为不同发酵温度下获得的发酵液对癌细胞IC₅₀的测试结果。

图4所示为蛹虫草菌黄耆发酵液对于CT26癌细胞存活率的测试结果。

图5所示为蛹虫草黄耆发酵液对于接种CT26癌细胞的BALB/c小鼠体重的影响。

图6所示为蛹虫草菌黄耆发酵液对于接种CT26癌细胞的BALB/c小鼠血液中白血球的影响。

图7a-b所示为蛹虫草菌黄耆发酵液对于接种CT26癌细胞的BALB/c小鼠脾脏的影响。

图8a-b所示分别为蛹虫草菌黄耆发酵液对于接种CT26癌细胞的BALB/c小鼠肿瘤体积和重量的影响。

具体实施方式