[发明专利]分离测定盐酸帕洛诺司琼光学异构体的方法

说明书

技术领域

本发明涉及分离测定盐酸帕洛诺司琼光学异构体的方法，具体地说，是涉及采用高效液相色谱法对盐酸帕洛诺司琼光学异构体进行拆分的方法。

背景技术

物质的分子和它的镜象不重叠，该分子就称为手性分子。若两个分子互为镜像关系，称这两个分子为对映异构体。对映异构体的构造相同，但构型不同，因而对映体的比旋光度数值相等，方向相反，其他物理性质相同，化学性质相似，但生理性质不同。对于以碳链为骨架的化合物来说，当与碳原子相连的四个原子或基团不同时，该碳原子就称为手性碳原子。含有n个手性碳原子的化合物的异构体数目一般为2ⁿ个(n为手性碳原子数目)。异构体构型的表示常采用R、S构型法，其规则为：把手性碳原子上四个基团中最小的基团放于离观测者最远的位置，来观察其他三个基团的顺序，若按顺序规则，三者的排列从最优基团到次优基团，到最小基团，若为顺时针，则其构型用R表示，反之，用S表示。

盐酸帕洛诺司琼是由瑞士Helsinn公司研发成功的一种高效、持久的5-羟色胺受体亚型3(5-HT₃)的选择性拮抗剂，临床上用于放、化疗所致的急性和延迟性恶心、呕吐。其分子式C₁₉H₂₄N₂₀.HCl，结构式为：

从上述结构可得知该原料具有两个手性中心，即四个光学异构体：S.S、S.R、R.R和R.S型异构体，其中S.S型异构体具有生物学效应。在盐酸帕洛诺司琼原料制备完成后，需要实施质量监控检测，由于目前还未建立对盐酸帕洛诺司琼原料中光学异构体检测的方法，因而缺乏对盐酸帕洛诺司琼原料实施完善的质量监控。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种分离测定盐酸帕洛诺司琼光学异构体的方法。

本发明分离测定盐酸帕洛诺司琼光学异构体的方法，包括采用高效液相色谱法对盐酸帕洛诺司琼光学异构体进行拆分，其中手性正相色谱柱以三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)直链淀粉为填充剂，流动相正己烷：乙醇:二乙胺的体积比为75～95:5～25:0.1～0.5，分离R.R、R.S、S.S型异构体的柱温为15～25℃，分离R.R.、S.S、S.R型异构体的柱温为35～45℃。

所述流动相的体积比优化为85～95:5～15:0.1～0.4。

所述分离R.R、R.S、S.S型异构体的柱温优化为15～20℃，分离R.R.、

S.S、S.R型异构体的柱温优化为40～45℃。

所述高效液相色谱法中流速为0.3～1.0ml/min；检测波长为210～230nm，优选220nm。

所述手性正相色谱柱的型号为AD型，优选AD-H型。

本发明采用手性正相色谱柱，通过对不同温度和流动相条件的筛选，最终获得了对四个异构体的拆分，提供了对盐酸帕洛诺司琼原料实施质量控制的重要依据，进而可有效地控制盐酸帕洛诺司琼原料的内在质量。

下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例。在不脱离本发明上述技术思想情况下，根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的各种替换或变更，均包括在本发明的范围内。

附图说明

图1R.R、S.S、S.R型异构体的分离色谱图；

图2R.R、R.S、S.S型异构体的分离色谱图。

具体实施方式

1.仪器与试剂

1.1仪器与试剂：

仪器：岛津2010高效液相色谱仪，色谱级正己烷、乙醇(Merck公司)，二乙胺(分析纯)。

试剂：S.R、R.R、R.S型异构体，三批盐酸帕洛诺司琼原料PAL040601、PAL040602、PAL040603(深圳万乐药业有限公司)。

1.2色谱条件：

色谱柱：CHIRALPAK AD-H5μ250mm×4.6mm(江苏汉邦科技有限公司)，以三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)直链淀粉为填充剂

检测器及检测波长：UV—220nm

流动相：正己烷：乙醇:二乙胺(92:8:0.4)

流速：0.6ml/min，进样量：20μl

柱温：20℃(R.R、R.S、S.S)和42℃(R.R、S.S、S.R)

2.溶液的制备

供试品溶液精密称取盐酸帕洛诺司琼原料约12.5mg，置25ml容量瓶中，加流动相适量使溶解，并稀释至每1ml含盐酸帕洛诺司琼0.5mg。