[发明专利]确定优质螺旋藻生产品系的方法无效
| 申请号： | 200710069963.7 | 申请日： | 2007-07-09 |
| 公开（公告）号： | CN101126067A | 公开（公告）日： | 2008-02-20 |
| 发明（设计）人： | 汪志平;张巧生;李晋楠;黄晖;李雪斌;杨灵勇 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N1/12 | 分类号： | C12N1/12 |
| 代理公司： | 杭州中成专利事务所有限公司 | 代理人： | 陈祯祥 |
| 地址： | 310027浙江省杭州市*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 确定 优质 螺旋藻 生产 品系 方法 | ||
1.确定优质螺旋藻生产品系的方法，其特征是将候选的螺旋藻品系用引物S35和S99扩增条带，当分子量为680bp和900bp时，其性状为优良可用；而当扩增条带分子量为650bp和900bp时，则其性状为劣不可用。
2.按权利要求1所述确定优质螺旋藻品系的方法，其特征是采用下列操作步骤：
(1)选用材料为5株螺旋藻品系，即Sp-1、Sp-2、Sp-3、Sp-4和Sp-5；
(2)试剂和仪器
Taq DNA聚合酶和琼脂糖为上海生工生物工程公司产品；dNTP、DNA限制性内切酶、RNaseA均为日本TaKaRa公司产品；PCR随机引物由上海英骏公司合成，其它试剂均为分析纯，序列扩增用美国Hybaid公司的Thermal Cycler PCR仪；
(3)PCR引物与扩增
随机引物S35 5’-TTCCGAACCC-3’和S99 5’-GTCAGGGCAA-3’，25μL PCR反应体系中含10倍的PCR缓冲液2.5μL，4种dNTP各1μmol/L，引物0.5μmol/L，2.5U的Taq DNA聚合酶，100ng基因组DNA，PCR反应程序为94℃5min；94℃30s，36℃1min，72℃1min，35个循环；最后72℃延伸10min；
(4)电泳分析和观察
将扩增产物在1％的琼脂糖凝胶上电泳，电压4V/cm。电泳完后用EB染色约30min，再在VersaDocTMImaging System 3000凝胶成像系统Bio-Rad，USA观察并照相，经过观察比对被筛选的螺旋藻品系用引物S35和S99扩增出条带的分子量。
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