[发明专利]清开灵注射液中间体及成品中指标成分含量的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及清开灵注射液生产过程中间体及成品中指标成分含量的快速测定方法，更具体地说，涉及银黄液中绿原酸和黄芩苷含量的紫外光谱测定方法，四混液中栀子苷和总氮的含量的紫外光谱测定方法，涉及到对清开灵注射液生产过程中间体-银黄液中绿原酸及黄芩苷含量的测定方法或对该中间体银黄液中绿原酸及黄芩苷含量的在线检测方法，涉及到对清开灵注射液生产过程中间体四混液中栀子苷和总氮的含量的在线检测方法。

背景技术

清开灵注射液是由古方安宫牛黄丸经拆方研制而成的一种现代中药注射剂，其处方由胆酸、猪去氧胆酸、珍珠母、板蓝根、水牛角、黄芩苷、栀子、金银花八味药组成，具有清热解毒、清营凉血、泻火除烦、化痰通络、镇惊安神、醒神开窍的功能。清开灵注射液中间体及成品中的指标成分包括总氮、黄芩苷、栀子苷、胆酸、猪去氧胆酸和绿原酸。银黄液是清开灵注射液生产过程中间体之一，是由金银花提取液与黄芩苷水溶液按照一定比例混合而成。目前，相关规定及报导中多采用凯氏定氮法测定清开灵注射液成品中的总氮含量，采用高效液相色谱法测定成品中其它指标成分：例如绿原酸和黄芩苷的含量，但未见对生产过程中间体中的指标成分：绿原酸和黄芩苷进行检测，并且这些方法检测时间长，不适于中药制剂生产过程的在线质量控制。

发明内容

为了克服现有的检测方法费时的缺点，实现清开灵注射液生产过程中间体及成品中的指标成分的在线检测，本发明采用紫外光谱法结合化学计量学例如偏最小二乘法进行分析和数据处理，不仅快速方便，而且准确可靠。

本发明的清开灵注射液中间体及成品中指标成分含量的测定方法，通过下述技术方案予以实现：

清开灵注射液中间体及成品中指标成分含量的测定方法，其特征在于：采用高效液相色谱法及其它分析方法(如凯氏定氮法)测定清开灵注射液中间体及成品中指标成分的含量，并采用紫外分光光度法对稀释后的样品进行全波长扫描；将样品分为两部分，即校正集和验证集，根据校正集样品的紫外光谱数据及含量，采用化学计量学方法对数据进行处理，并利用TQ Analyst软件和Matlab6.5软件建立数学模型，再将验证集样品的紫外光谱数据代入数学模型，比较预测值与真值，验证该技术的准确可靠。

如以上所述的方法，其特征在于：所述的清开灵注射液中间体及成品中指标成分含量的测定方法是指：

银黄液中绿原酸及黄芩苷的含量的测定方法，是采用反相高效液相色谱法测定银黄液样品中绿原酸和黄芩苷的含量，并采用紫外光谱-化学计量学方法中的偏最小二乘法进行分析和数据处理；

上述银黄液紫外光谱的测定是指：采用HP-8453紫外-可见分光光度仪，将银黄液样品稀释2000倍，在190～400nm进行扫描，扫描间隔1nm；

上述采用紫外光谱-偏最小二乘法进行分析和数据处理是指：

采用紫外分光光度法对稀释2000倍的银黄液样品进行全波长扫描，将银黄液样品分为两部分，即校正集和验证集，根据校正集样品的紫外光谱数据及含量，采用偏最小二乘并利用TQ Analyst软件和Matlab 6.5软件建立数学模型，再将验证集样品的紫外光谱数据代入数学模型，比较预测值与真值，验证该技术的准确可靠；

上述运用TQ Analyst软件是指，分别采用逐步多元线形回归、主成分回归和偏最小二乘法进行数据处理，建立UV预测模型，并对模型进行检验，比较结果。

如以上所述的方法，其中上述采用TQ Analyst软件进行数据处理，是以偏最小二乘PLS为例，说明以下数据处理过程的：

打开TQ Analyst软件，看操作界面，在标签栏可以看到：“Description”、“Pathlength”、“Component”等标签；

在“Description”标签下，选择定量方法为PLS，并为该分析方法加标题及相关信息；

在“Pathlength”标签下，选择光程类型constant，固体样品则选择MSC或SNV；

在“component”标签下，填写样品中待测组分信息，包括组分名称、缩写、单位、测量精度；

待测组分为绿原酸和黄芩苷，含量单位为mg·mL^-1，测量精度到小数点后4位，并定义分析范围，绿原酸含量范围是0～1mg·mL^-1，黄芩苷含量范围是20～45mg·mL^-1；

在“Standards”标签下，点击“Open Standard”，选择用于建模的样品的UV光谱，常见文件格式有.spa和.csv，填写各样品中组分含量；