[发明专利]甾体化合物分析方法

说明书

技术领域

本发明涉及卤甲松系列化合物以及其合成涉及的一些中间体的分析方法。

背景技术

卤甲松是一个含卤基的强效外用糖皮质类固醇药物，具有快速抗炎、抗过敏、止痒、血 管收缩、抗渗出及抗增生作用，它活性强作用快，广泛应用于不同类型的炎症性皮肤病，能 迅速地减轻和消除如瘙痒等症状。

关于卤甲松的文章报道的已经很多，但是关于其分析方法的相关报道，主要是涉及其制 剂的分析方法只有一篇，简单介绍如下：

文献Cesko-Slovenska Farmacie (1986)，35(6)，265-9.提到了利用微分脉冲极谱 (differential pulse polarography；DPP)方法，对卤甲松软膏，乳膏和片剂中卤甲松的含量进行测 定。

该文献报道的方法虽然可以用来分析卤甲松，但是适用性范围比较窄，微分脉冲极谱应 用起来不够方便。为了了解卤甲松工艺路线中各个中间体的含量和变化过程，监控反应过程， 需要一种适用性很广泛的分析方法，比如普通的高压液相法，能对合成路线上涉及到的中间 体以及成品进行系统得分析比较，以便于分析最终产品中产生的杂质的来源及其含量，可以 通过优选反应条件，减少反应过程产生的杂质。然而，目前未见文献报道解决该问题。

发明内容

针对卤甲松以及合成涉及的一些中间体的系统分析方法问题，本发明提供了一个全新的 卤甲松液相分析方法，该方法能够系统分析卤甲松系列化合物以及其合成过程中间体。色谱 法参照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录VD)测定。

本发明提到的液相方法，测试样品为：卤甲松系列化合物以及其合成过程中间体，即式 (I)化合物，其结构式为：

其中1，2位上的为单键或双键，R＝H或COR3，其中R3＝5个碳以下的烷基；R1＝ H或卤素，R2＝H或卤素。其分析方法如下：

a色谱柱选用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱

b以乙腈和水为流动相，

c检测波长为235-255nm

d取测试样品适量，精密称定，加乙腈溶解并用乙腈稀释制成一定浓度Ca的溶液，摇匀，精 密量取50μl注入液相色谱仪，记录色谱图。

本发明提到的分析方法得到的色谱图是测试样品的归一法液相色谱图，得到了测试样品 的归一法液相含量，使用同样的分析方法，可以得到测试的对照品的归一法液相含量，然后 通过公式计算，可以得到测试样品的外标法的液相含量。即本发明提到的分析方法可以用于 测定测试样品的外标法液相含量，其具体过程是：分别测定测试样品和测试的对照品的归一 法液相含量，按外标法以峰面积计算，即得到该样品的液相含量C％；

C％＝Aa/As×Cs/Ca×100％

其中Aa为测试样品液相主峰面积；As为测试的对照品液相主峰面积；

Ca为测试样品浓度；Cs为测试的对照品浓度。

本发明提到分析方法中测试的对照品为对应测试样品精制得到的含量为99.5％以上的标 准品或工作标准品。

本发明提到的分析方法中，式(I)化合物优选1，2位为双键。

本发明提到的分析方法中，卤甲松系列化合物以及其合成过程中间体优选：R＝H或 COCH3，R1＝H或Cl，R2＝H或Cl。

本发明提到的分析方法中，卤甲松系列化合物以及其合成过程中间体优选：1，2位上为 双键，R＝H或OCOR3，其中R3＝5个碳以下的烷基；更优选R1＝卤素，R2＝H；1，2位上 为双键，R＝H或COCH3，R1＝卤素，R2＝H。最优选1，2位上为双键，R＝H或COCH3， R1＝Cl，R2＝H；以及1，2位上为单键，R＝H或COCH3，R1＝Cl，R2＝Cl。

本发明提到的分析方法不仅适用于分析卤甲松系列化合物以及其合成过程中间体，也适 合于分析卤甲松制剂中的卤甲松含量。

本发明提到的分析方法，流动相乙腈和水的体积配比选自：乙腈∶水＝35∶75～50∶50； 优选体积配比：乙腈∶水＝40∶60～45∶55；最优选乙腈∶水＝43∶57。本方法涉及的测试样 品浓度Ca和测试样品的对照品浓度Cs可在0.1～10mg/ml范围内，优选1～8mg/ml，最优选 0.2～1mg/ml。