[发明专利]一种五环三萜皂苷类化合物及制备方法及用途

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，确切地说涉及一种五环三萜皂苷类化合物及制备方法及用途。

背景技术

朱砂根为紫金牛科紫金牛属植物朱砂根(Ardisia crenata Sims)的根。性味苦、辛、凉，具有清热解毒、散瘀止痛的作用。用于治疗上呼吸道感染、扁桃体炎、白喉、丹毒、淋巴结炎、劳伤吐血、心胃气痛、风湿骨痛、跌打损伤等症。百两金皂苷A和B(ardisiacrispinA和ardisiacrispin B)是从中药朱砂根中分离得到的主要三萜皂苷类活性成分之一。药理学研究表明，对人的五种肿瘤细胞具有很强的细胞毒活性(MCF-7:IC₅₀4.72μM；NCI-H460:IC₅₀23.58μM；SF-268:IC₅₀2.36μM；HepG2:IC₅₀6.60μM)，近来研究发现其对HL-60(人早幼粒细胞)细胞增殖有抑制作用。同时又测定了其对正常的人胚肾293细胞的生长的影响(293:IC₅₀>24μM)，结果显示对正常细胞的细胞毒性很小。百两金皂苷A和B的组合物进行HPLC检测，百两金皂苷A和B的总含量为99％。其性状为白色粉末(MeOH)，可溶于甲醇、乙醇。

微生物转化反应就是利用微生物代谢过程中某个或一组酶对底物进行催化的反应。具有高度立体选择性，不仅对结构有化学选择性和非对映异构体选择性，并且有严格的区域选择性。而且反应条件温和，公害少，成本低廉。对中药成分生物转化进行研究，其主要目的就是通过对中药有效成分在微生物体内的转化产物的研究来寻找新药源，以及对新活性成分的发现，新前体物质的制备，都有着极其重要的意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种与百两金皂苷A相比，具有更好的水溶性，更适合药物制剂的一种五环三萜皂苷类化合物。

本发明的第二个目的是提供一种五环三萜皂苷类化合物的制备方法。

本发明的第三个目的是提供一种五环三萜皂苷类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明的技术方案概述如下：

一种五环三萜皂苷类化合物，其特征是具有下述结构：

化学名为：西克拉明皂苷元A-3β-O-{α-D-半乳吡喃糖基-(1→4)-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→2)-[β-D-木吡喃糖基-(1→2)-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→4)]}-α-L-阿拉伯吡喃糖苷。

一种五环三萜皂苷类化合物的制备方法，是由下述步骤组成：

(1)微生物的培养：将燕麦曲霉(AA3.4454)从固体培养基接种至预先配制好的液体土豆培养基中，所述液体土豆培养基100ml中含葡萄糖1-5克；置于恒温振荡器中，在120-180rpm，24-28℃培养36-72小时；

(2)将百两金皂苷A溶于甲醇或体积百分比浓度为50％-100％的乙醇水溶液或体积百分浓度为50％的丙酮水溶液中，配成10-100mg/ml，加入步骤(1)制成的发酵液中，在120-180rpm，24-28℃，培养2-6日；

(3)发酵液的处理：发酵液抽滤后收集滤液，减压浓缩至原体积的1/10-1/20，用等体积正丁醇萃取2-4遍，萃取液合并浓缩至干，获得粗浸膏；

(4)转化产物的分离纯化：将步骤(3)得到的粗浸膏用大孔树脂柱层析分离，以体积比为100：0-0：100的水-乙醇或水-甲醇梯度洗脱得到转化产物富集物，利用制备高效液相制备，Rp18色谱柱，流动相为体积百分比为35％-60％的甲醇水溶液或25％-60％的乙腈水溶液，获得化学名为：西克拉明皂苷元A-3β-O-{α-D-半乳吡喃糖基-(1→4)-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→2)-[β-D-木吡喃糖基-(1→2)-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→4)]}-α-L-阿拉伯吡喃糖苷。

所述大孔树脂优选：HP20型大孔树脂、D101型大孔树脂、AB-8型大孔树脂、YWD-01型大孔树脂。

一种五环三萜皂苷类化合物，化学名为：西克拉明皂苷元A-3β-O-{α-D-半乳吡喃糖基-(1→4)-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→2)-[β-D-木吡喃糖基-(1→2)-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→4)]}-α-L-阿拉伯吡喃糖苷在制备抗肿瘤药物中的应用。