[发明专利]新一代早期诊断前列腺癌试剂盒及其制备方法和检测方法

说明书

一种新的定量分析前列腺病人血清中前列腺特异抗原与α1-抗糜蛋白酶复合蛋白标记物的试剂盒及其制备方法和检测方法。

技术领域

本发明为一种新的定量检测方法，检测前列腺癌病人血清中前列腺特异抗原与α1-抗糜蛋白酶复合物标记物方法(包括制备方法和检测方法)。

技术背景

前列腺癌(prostate cancer)在发达国家中发病率很高，死亡率在第二位。以美国为例，每年有18万以上新病例。而中国是发展中国家，据2005年的统计显示，每年有1500万50岁以上的男性进行前列腺癌的相关检查。当前国际上普遍使用的普查和诊断前列腺癌的方法是总前列腺特异抗原检测方法。总前列腺特异抗原包括游离前列腺特异抗原(Free PSA或fPSA和复合前列腺特异抗原(complexed PSA或cPSA)。人们认为正常成年男性前列腺器官产生游离前列腺特异抗原PSA(Wang et al.Invest Urol 1979；17：159-63；Watt et al.，Proc Natl Acad Sci USA 1986；83：3166-70)，此游离前列腺特异抗原为蛋白酶(Akiyama et al.，FEBS Letters 1987；225：168-72；Christenssonet al.，Eur J Biochem 1990；194：755-763；Lilja et al.J Clin Invest 1985；76：1899-903)，当游离前列腺特异抗原从病人前列腺中浸润到病人的血液中时，引起炎症。此时，血液中抑制游离前列腺特异抗原蛋白质(包括α1-抗糜蛋白酶，α1-抗胰蛋白酶和α2-巨球蛋白)结合到游离前列腺特异抗原上，形成复合物，例如前列腺特异抗原与α1-抗糜蛋白酶复合物(PSA-ACT)，前列腺特异抗原与α1-抗胰蛋白酶复合物(PSA-AT)，前列腺特异性抗原与α2-巨球蛋白复合物(PSA-A2M)，以抑制游离前列腺特异抗原活性反应(Stenman et al.Cancer Res 1991，51：222-226；Zhou et al.Clin Chem1993，39：2483-91；Leinonen et al.Clin Chem 1993，39：2098-2103；Christensson etal.J Urol 1993，150：100-105；Lilja H.Urol Clin North Am 1993，20(4)：681-686；Lilja et al.Clin Chem 1991，37：1618-1625；Bjork et al.Urology 1994，43：427-434；Allard et al.Clin Chem 1998，44：1216-23)。使游离前列腺特异抗原蛋白酶失去抑制蛋白酶活性作用。此形成的前列腺特异抗原复合物浓度与前列腺病情成正相关。虽然有几种与游离前列腺特异抗原结合的抑制蛋白酶复合物，其中包括1)前列腺特异抗原与α1-抗糜蛋白酶复合物(PSA-ACT)，2)前列腺特异抗原与α1-抗胰蛋白酶复合物(PSA-AT)和3)前列腺特异性抗原与α2-巨球蛋白复合复合物(PSA-A2M)。其中前列腺特异抗原与α1-抗胰蛋白酶复合物含量很少，占1-3％；而前列腺特异性抗原与α2-巨球蛋白复合物不能为抗体所识别，只有前列腺特异抗原与α1-抗糜蛋白酶复合物能被抗体所识别。并且占有很高的浓度(Stenman et al.Cancer Res 1991，51：222-226；Zhou et al.ClinChem 1993：39：2483-91；Allard et al.Clin Chem 1998，44：1216-23)。