[发明专利]一种具有抗肝炎病毒活性的生物碱类新化合物

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及以獐牙菜苦苷为原料，通过与真菌Aspergillus niger混合培养而代谢生成的一个新化合物，其骨架属于生物碱类。本发明也涉及这个化合物的制备方法；本发明还涉及这个化合物在制备药物方面的用途，特别是在制备抗肝炎药物等领域。

背景技术

肝炎是世界上重大传染性疾病，近年来呈逐渐上升趋势。我国是肝炎大国，2006年全世界有3.5亿乙肝病毒携带者，中国有近1.2亿；丙肝病毒携带者1.7亿，中国也有近2000万。2000年全球约有200万人死于与病毒有关的乙肝癌和晚期肝硬化，中国也有近30万人死亡。藏茵陈来源于龙胆科(Gentianaceac)獐牙菜属(Swertia)植物，该属多种中药、民族药及民间药均有长期治疗肝炎的临床背景。藏茵陈在治疗肝炎后高胆红素血症、急性黄胆肝炎和慢性肝炎均取得了良好的效果。獐牙菜苦苷是藏茵陈中的一个主要的有效成分。对獐牙菜苦苷的代谢研究自20世纪八十年代以来已有报道，先后有红百金花内酯、龙胆宁碱等化合物被分离鉴定。我们在针对獐牙菜苦苷在真菌Aspergillus niger中代谢研究中分离并鉴定了一个新的水溶性的化合物，药效学研究表明以该化合物为主要组成的制剂具有良好的抗炎作用。针对该化合物，通过实验确定了合理的制备技术，利用该技术制备的产物可以使该化合物的含量高于70％。

发明内容

本发明的目的是提供一种以獐牙菜苦苷为原料，通过代谢、分离制备一个新的化合物I：

化合物I命名为(4-(1-Methylaminpmethyl-vinyl)-5，6-dihydropyran-2-one)。分子组成：C₁₀H₁₂O₃N；分子量：195；紫外光谱UV：λmax：279.2nm。高分辨率质谱：ESI-MS(int.rel)：194.2165(100，M+)，178.1823(81，[M+-CH3])，150.2017(62，[M+-CO2])，132.1857(12，[M+-CO2-H2O])，104.1323(51)，90.105(52)。核磁共振氢谱¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：3.41(2H，t，J＝6.0Hz，6-H2)，4.36(2H，t，J＝6.0Hz，7-H2)，7.42(1H，t，J＝7.7Hz，10-H)，7.87(1H，dd，J＝7.7Hz，J＝1.3Hz，8-H)，8.23(1H，dd，J＝7.7Hz，J＝1.3Hz，3-H)，10.3(1H，s，1-H)。核磁共振碳谱¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)δ：24.2(C-6)，66.6(C-7)，127.1(C-5)，127.8(C-10)，132.6(C-4)，135.8(C-3)，138.2(C-8)，141.0(C-9)，164.7(C-11)，191.5(C-1)。

依据上述理化性质，结合二维核磁共振谱HMBC，HSQC和COSY，确证本化合物的结构如下，即式(I)。

本发明的另一个目的是提供上述化合物的制备方法，本发明的制备方法可以使该化合物的含量高于90％，包括以下步骤：

1、将獐牙菜苦苷溶液加入真菌Aspergillus niger培养液中，使獐牙菜苦苷的最终浓度为0.5mg/ml，在37℃，160rpm下培养5天。培养液收集、过滤、减压浓缩；

2、将上述浓缩液离心、上清液用石油醚萃取后，再用三氯甲烷或乙酸乙酯萃取3次，萃取液合并，回收溶剂至干；

3、将残留物溶于水中，过滤得上清液，此上清液用于制备液相分离，制备液相条件为：流动相：A(0.04％甲酸/乙腈溶液)和B(0.04％甲酸/水溶液)；梯度条件为：0～10min 15％A，10～30min 15％A～24％A，30～40min 24％A～100％A。流速为20ml/min。制备液相分离接收液减压浓缩、冷冻干燥，干燥物再经一次制备液相制备，制备液相条件为：15％A等梯度。流速为20ml/min。接收液减压浓缩、冷冻干燥，干燥得纯度为98％的化合物(I)。

上述方法获得的化合物(I)的含量大于98％。

制备含量为70％以上的方法如下：

1、将獐牙菜苦苷溶液加入真菌Aspergillus niger中，使獐牙菜苦苷的最终浓度为0.5mg/ml，在37℃，160rpm下培养5天。培养液收集、过滤、减压浓缩；