[发明专利]一种测定人类免疫缺陷病毒（1＋2型）不同抗原表位产生的特异性HIV抗体的方法及抗原条

说明书

技术领域

本产品涉及体外免疫诊断领域，特别涉及一种测定人类免疫缺陷病毒 (1+2型)不同抗原表位产生的特异性HIV抗体的方法，并根据其测定结果判 断被测者是否感染HIV以及感染哪个亚型的HIV。

背景技术

艾滋病(AIDS)，又名获得性免疫缺陷综合征(acquired immuno-deficiency syndrome)，是由人类免疫缺陷病毒(Human Immune Deficiency Virus，HIV)引起的一种严重传染病。通过性接触和体液传播， 能破坏人的免疫系统，特别是细胞免疫系统，以机会性感染和恶性肿瘤为特 征的慢性传染病。艾滋病是一种目前尚无有效治愈办法、病死率极高的传染 病，它在全世界的广泛流行已成为严重的公共卫生问题和社会问题。

目前美国杜邦公司、伯乐公司，法国生物梅里埃(原“阿克苏”)等公司 先后推出了艾滋病确证试剂。这些进口试剂价格昂贵，而国内绝大多数感染 者集中在农村或不发达地区，无法承担昂贵的检测费用。这种状况极大地限 制了确认试剂在我国艾滋病检测工作的应用。国内只有极少数研究机构进行 了艾滋病免疫印迹确诊试剂的研制工作，仅有的一种国产确认试剂由于采用 全病毒作为抗原，其特异性受到限制，同时复杂的工艺也使得试剂的成本很 高，价格与进口产品相差不大，无法在国内推广使用。确认试剂的国产化， 尤其是是研制工艺简单、价格低廉的确认试剂已经迫在眉睫。

发明内容

本发明目的在于提供一种成本低、效果好的测定人类免疫缺陷病毒(1+2 型)不同抗原表位产生的特异性HIV抗体的方法及抗原条，根据其测定结果 可确证被测者是否感染HIV以及感染哪个亚型的HIV。

为达上述目的，本发明采用如下技术方案：一种测定人类免疫缺陷病毒 (1+2型)不同抗原表位产生的特异性HIV抗体的方法，包括以下步骤：

(1)用特异性HIV基因重组抗原包被于抗原条上的硝酸纤维素膜上制备 HIV抗体特异性WB抗原条带；

(2)用胶体金标记羊抗—人IgG作为信号示踪系统；

(3)利用待测样本中的HIV特异性抗体先与胶体金标记羊抗—人IgG反 应，然后与其对应的特异性抗原反应，形成特异性HIV抗原—特异性HIV抗 体—胶体金标记羊抗人IgG抗体夹心复合物，通过胶体金颗粒特有的颜色示 踪而判断特异性抗体的有无。

所述的特异性HIV基因重组抗原包括：

HIV-1Env带的gp41、gp120和gp160基因重组抗原片段，Gag带的p55 和p24基因重组抗原片段，Pol带的p51和p31基因重组抗原片段，和HIV-2 的gp36基因重组抗原片段。

测定人类免疫缺陷病毒(1+2型)不同抗原表位产生的特异性HIV抗体的 抗原条，包括PVC材质的底板，底板上面中间部位设有包被HIV特异抗原的 硝酸纤维素膜，硝酸纤维素膜下部上面叠合包被羊抗—人IgG胶体金标记抗 体的聚酯膜材质的胶体金垫，胶体金垫上面叠合有玻璃纤维材质的样品垫， 硝酸纤维素膜上部上面贴合吸引样品的棉浆板。

所述的特异性HIV基因重组抗原包括：

HIV-1Env带的gp41、gp120和gp160基因重组抗原片段，Gag带的p55 和p24基因重组抗原片段，Pol带的p51和p31基因重组抗原片段，和HIV-2 的gp36基因重组抗原片段。

所述的胶体金由橘橼酸钠还原氯金酸制备，胶体金颗粒大小为20—60nm； 胶体金标记羊抗—人IgG用碳酸钾调PH值6.0—9.0，单抗标记浓度为3—20 μg/ml；抗原包被浓度为1.0mg/ml。

本发明使用基因重组抗原，避免了病毒全裂解抗原的随意性和不可控性， 极大的减少了非特异性反应，可以选择优势抗原的优势表位表达，提高检测 的灵敏度和敏感性，同时大大提高了试剂的稳定性；使用金标记技术显色， 避免了因为酶标记引入底物和显色剂等相对性质不稳定试剂所引入的非特异 性反应以及试剂变性所引发的漏检的危险，操作更加简单。成本低，不需要 任何检测设备。

附图说明

图1为本发明抗原条模式图，其中a为HIV-1型阳性，b为HIV-2型阳性， c为阴性；

图2为本发明结构示意图。

具体实施方式