[发明专利]猪胴体性状GFAT1基因的克隆及应用无效
| 申请号： | 200710052793.1 | 申请日： | 2007-07-20 |
| 公开（公告）号： | CN101130776A | 公开（公告）日： | 2008-02-27 |
| 发明（设计）人： | 余梅;刘科;赵书红;刘榜;樊斌;朱猛进;李长春;白雪;杜小勇 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C07H21/04;C12Q1/68;C12N15/65 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 | 代理人： | 王敏锋 |
| 地址： | 430070湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 胴体 性状 gfat1 基因 克隆 应用 | ||
1.一种猪胴体性状GFAT1基因，它的cDNA序列如序列表SEQID NO：1所述。
2.一种猪胴体性状GFAT1基因，它的DNA序列如序列表SEQ ID NO：2所述。
3.根据权利要求2所述的DNA序列，其特征在于：序列表SEQ ID NO：2的第101bp处有一个G101-A101的碱基突变，导致MvaI-RFLP多态性。
4.根据权利要求1所述的猪胴体性状GFAT1基因，其中克隆GFAT1基因所用的引物序列如SEQ ID NO：1所示。
5.根据权利要求2所述的猪胴体性状GFAT1基因，其中扩增GFAT1基因第8内含子所用的引物序列如SEQ ID NO：2所示。
6.权利要求1或2所述的猪胴体性状GFAT1基因在猪分子标记辅助选择中的应用。
7.权利要求4或5所述的引物在猪分子标记辅助选择中的应用。
8.一种筛选猪胴体性状基因GFAAT1分子标记方法，按照以下步骤制备：
第一步
用人GFAT1基因cDNA为信息探针，作同源序列筛选，获得同源性85％以上的表达序列标签；然后拼接猪表达序列标签-重叠群；根据表达序列标签-重叠群设计四对引物，扩增得到目的片段；以成年鄂西黑猪肌肉组织提取总RNA为模板，作RT-PCR扩增，PCR产物纯化和克隆测序，进行序列分析，获得如序列表SEQ ID NO：1所述的cDNA序列；
第二步
从猪血液基因组提取DNA，以猪GFAT1基因cDNA序列为模板设计引物，进行PCR扩增，PCR产物纯化和克隆测序，获得如序列表SEQ ID NO：2所述DNA序列，应用PCR-RFLP方法检测猪GFAT1基因的多态性。
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