[发明专利]乙酰胆碱酯酶的提取方法及应用

权利要求书

1.乙酰胆碱酯酶的提取方法，其特征在于分别取鲫鱼脑、肌肉和肝脏各组织，用pH7.5，0.1mol/L的磷酸缓冲溶液，在冰浴条件下匀浆，制成匀浆液，匀浆质量体积比为1∶4，在4℃下，以10000～12000r/min冷冻离心25～30min，得上清液，即为乙酰胆碱酯酶提取液，保存于冷藏室中。

2.乙酰胆碱酯酶的应用，其特征在于用于快速检测有机磷农药的残留量，检测方法是以鲫鱼脑乙酰胆碱酯酶为酶源，以2，6-二氯靛酚钠为显色剂，以定性滤纸为载体并以吸附法固定化酶制得有机磷农药快速检测试纸，具体操作步骤如下：

取一张硬纸片，对称地粘上直径10±2mm的小滤纸片，一边加入润湿滤纸量的，浓度为0.5％的2，6-二氯靛酚钠溶液和润湿滤纸量的，浓度为100mmol/L的碘化硫代乙酰胆碱溶液，另一边加上润湿滤纸量的提取出的鲫鱼脑乙酰胆碱酯酶溶液，放入冰箱中冷藏干燥20小时以上，小滤纸片上盖上同样大小的纤维滤膜，检测时，取用有机磷农药洗脱液湿润的滤纸片，对折使两滤纸片叠合，10～15分钟后观察试纸变色现象，无有机磷农药存在时试纸在10～15分钟内由蓝色变为无色，有有机磷农药存在时蓝色不褪或褪色不明显。