[发明专利]特异检测强毒型和中毒型鸡新城疫病毒的荧光定量PCR引物及方法无效
| 申请号： | 200710050161.1 | 申请日： | 2007-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN101153343A | 公开（公告）日： | 2008-04-02 |
| 发明（设计）人： | 岳华;汤承;刘小银;杨发龙;张焕容 | 申请（专利权）人： | 西南民族大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68 |
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| 地址： | 610041四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 特异 检测 强毒型 中毒 新城 疫病 荧光 定量 pcr 引物 方法 | ||
【权利要求书】：
1.用于特异检测强毒型和中毒型鸡新城疫病毒的荧光定量PCR引物，引物序列为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示序列。
2.荧光定量PCR特异检测强毒型和中毒型鸡新城疫病毒的方法，其特征在于，所述方法是根据样品中核酸的PCR反应的扩增曲线结果提供强毒型和中毒型鸡新城疫病毒的特异性指示；从待测样本中提取RNA并反转录合成cDNA作为模板；PCR反应中采用SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示序列的引物；PCR反应体系为25μl时包括：在PCR管中依次加入SYBRPremix Ex TaqTM 12.5μl，浓度为10μM的SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2引物各0.5μl，去离子水10.5μl，最后加入模板到25μl，混合后在荧光定量PCR仪上进行热循环，其条件为：95℃预变性3min；然后进行共40个94℃30s，58℃30s，72℃40s的循环，反应结束后进行溶解曲线分析；在无模板对照和空白对照没有出现扩增曲线的条件下，凡出现扩增曲线且产物的熔解温度为86±1.0℃的均为阳性结果，不出现扩增曲线的为阴性结果。
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