[发明专利]从粘质沙雷氏菌分离的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因序列及表达重组菌株

权利要求书

1.一种分离的S-腺苷甲硫氨酸合成酶多肽，其特征在于，该多肽选自下组：

(a)具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽；

(b)将SEQ ID NO：2氨基酸序列经过一个或多个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的，且具有合成S-腺苷甲硫氨酸功能的多肽。

2.如权利要求1所述的多肽，其特征在于，该多肽是具有SEQ ID NO：2所示氨基酸序列的多肽。

3.一种分离的多核苷酸，其特征在于，它包含一核苷酸序列，该核苷酸序列选自下组：

(a)编码如权利要求1所述多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。

4.如权利要求3所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸编码具有SEQ IDNO：2所示氨基酸序列的多肽。

5.如权利要求3所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸具有SEQ ID NO：1所示的序列。

6.一种载体，其特征在于，它含有权利要求3所述的多核苷酸。

7.一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，它含有权利要求6所述的载体。

8.权利要求1所述的多肽的制备方法，其特征在于，该方法包含：

(a)在适合表达的条件下，培养权利要求7所述的宿主细胞；

(b)从培养物中分离出S-腺苷甲硫氨酸合成酶多肽。

9.一种从粘质沙雷氏菌基因组中分离S-腺苷甲硫氨酸合成酶的编码基因的方法，其特征在于，所述的方法包括：

(1)用限制性内切酶HindIII消化粘质沙雷氏菌基因组DNA，从消化产物中分离3-5kb的DNA片段，并使这些DNA片段自身环化连接，形成自身环化分子；

(2)以步骤(1)获得的自身环化分子为模板，以SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示序列的引物进行PCR扩增，收集分子量约1155±50bp的扩增产物；

(2)对步骤(2)获得的扩增产物进行测序验证，获得含有完整阅读框的基因，即为S-腺苷甲硫氨酸合成酶的编码基因。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，在步骤(1)中，自身环化连接的温度是12℃。