[发明专利]糙海参中皂苷类抗真菌化合物及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，是从海洋动物糙海参中分离到的皂苷类抗真菌化合物scabraside A和scabraside B及其制备方法。

背景技术

糙海参(Holothuria scabra Jaeger)是一种大量生长于我国广东中西部、广西东兴到海南岛海域的海参纲动物，属海参科海参属。体长一般30-40cm，直径8-10cm，体壁厚，骨片丰富，边缘平滑。糙海参是重要的食用海参之一，它体大肉厚，品质极佳。因肉质白而透明，又称明玉参、白参或沙参。药用价值极高，是滋补珍品〔廖玉麟编著，中国动物志，棘皮动物门，海参纲[M].北京：科学出版社，1997，116-117〕。但未见有关从糙海参中提取分离到皂苷类化合物scabraside A和scabraside B及其抗真菌活性的报道。

发明内容

本发明从生长于中国南海海域的糙海参中提取分离到2种新的皂苷类化合物，分别命名为scabraside A，scabraside B，它们的化学结构通式如下：

本发明化合物的制备方法如下：

(1)制备总皂苷提取物：将糙海参干品粉碎，用55％～60％乙醇热回流提取，浓缩提取液，得到流浸膏。将流浸膏溶于水中过滤，将滤液通过大孔树脂柱HP60，然后依次用水、50％和70％乙醇洗脱，收集50％和70％乙醇洗脱液，减压回收乙醇，得到总皂苷提取物。

(2)分离提纯：将上述总皂苷提取物进行硅胶柱层析，以氯仿∶甲醇∶水＝8～6.5∶2～3.5∶1混合溶剂洗脱，薄层层析检测，收集含有皂苷的流分，再经过C₁₈反相柱层析，以甲醇∶水＝57～62∶43～38梯度洗脱，薄层层析检测，分别收集含scabraside A和scabrasideB的洗脱液，浓缩至干，分别得到scabraside A和scabraside B纯品。经多种现代光谱分析，特别是综合应用多种先进的二维核磁共振波谱的解析，确定了scabraside A和scabraside B的化学结构和立体构型。

1.scabraside A：白色结晶性粉末，熔点234～236℃(MeOH-H₂O)，分子式C₅₄H₈₅O₂₆SNa；[α]_D²⁰-11.3°(c＝0.4，MeOH)，Liebermann-Burchard反应和Molish反应均呈阳性。电喷雾阳离子质谱ESI-MS⁺m/z：1227[M+Na]⁺；电喷雾阴离子质谱ESI-MS^-m/z：1181[M-Na]^-；高分辨质谱HRESI-MS⁺中准分子离子峰提供的精确分子量m/z：1227.4856[M+Na]⁺(Calc.Mass 1227.4845)。IR(KBr)cm^-1：3421(羟基)，1761(羰基)，1653(双键)，1256，1073(磺酸基)。¹³C NMR与¹H NMR数据见表1。以三氟醋酸水解皂苷后得到组成皂苷糖链的单糖，将其制备成糖腈乙酸酯衍生物，进行气相色谱-质谱联用分析，经与标准糖的糖腈乙酸酯衍生物对照，确定scabraside A的糖链由D-木糖、D-奎诺糖、D-葡萄糖、3-甲氧基-D-葡萄糖组成，比例为1∶1∶1∶1。