[发明专利]固相多肽合成阿托西般的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种阿托西般的制备方法，具体涉及固相多肽合成阿托西般的制备方法。 

背景技术

中文名：阿托西般，醋酸阿托西般，阿托西班、醋酸阿托西班。 

英文名：Atosiban，Atosiban Acetate. 

结构式为： 

分子式为：C₄₃H₆₇N₁₁O₁₂S₂

分子量：994.2 

阿托西般在临床上为一种可以静注的子宫内及蜕膜、胎膜上受体的环状肽催产素竞争性拮抗剂。使用本品后可剂量相关性地抑制宫缩，并使环状肽催产素介导的前列腺素分泌减少，达到保胎的目的，可用于18岁以上，孕龄24—33周，胎儿心率正常的孕妇。国外怀孕妇女的临床实验中，本品分别与β2激动剂(利托君、沙丁胺醇、特布他林)中的一种进行了双盲比较研究，治疗意图分析的综合结果显示，本品有效地抑制宫缩，达到保胎的作用，且不良反应和停药者均较少。综合分析中两组的平均生产孕龄及胎儿或婴儿的指标(出生体重、存活率、呼吸窘迫综合征或颅内出血的发生率)未见显著差异。 

美国专利4,504,469是采用Boc路线，以氯甲基树脂为起始原料，经缩合反应完成接肽，用干燥的液氨进行切肽，最后经氧化反应和分离纯化。该专利存在的主要缺陷是，生产周期较长，操作复杂，人工成本较高，产生三废较多，不能满足有关方面的需要。 

发明内容

本发明的目的是公开一种固相多肽合成阿托西般的制备方法，以克服现有技术存在的缺陷。 

本发明的方法包括如下步骤： 

(1)以Rink Amide树脂、Rink Amide MBHA树脂或Rink Amide AM树脂为起始原料，以Fmoc保护的氨基酸为单体，用TBTU/HOBt、HBTU/HOBt、BOP/HOBt、TBTU/HOAt、HBTU/HOAt或BOP/HOAt为缩合剂进行接肽反应，逐个接上氨基酸，最后一个肽链使用保护的巯基丙酸(Map(X))；得保护的九肽树脂后，同步进行脱侧链保护基团及切肽。 

所说的Rink Amide树脂、Rink Amide MBHA树脂或Rink Amide AM树脂为一种常用的氨基树脂，可采用市售产品，如天津南开和成科技有限公司牌号为HC RAm04-1的产品； 

(2)然后加入切肽试剂(TFA/HBr/HAc/TIS/EDT)切肽； 

(3)以乙醚为溶剂，沉淀并收集还原型阿托西般粗品； 

(4)将还原型阿托西般粗品溶于水中，用氨水调节PH到7.5-10.0，收集氧化型阿托西般粗品； 

(5)将收集的粗品通过制备型HPLC(C₁₈或C₈柱)分离纯化，获得目标产物，总收率可达到18.5％以上。 

以Fmoc保护的氨基酸为单体，逐个接上氨基酸时的反应温度为10～60℃，切肽温度为10～60℃； 

优选的，本发明的方法，包括如下步骤： 

Rink Amide树脂、Rink Amide MBHA树脂或Rink Amide AM树脂与Fmoc-Gly-OH、TBTU/HOBT和六氢吡啶反应，获得Fmoc-Gly-树脂； 

然后与Fmoc-Om(Boc)-OH、TBTU/HOBT和六氢吡啶反应，获得Fmoc-Orn(Boc)-Gly-树脂； 

然后与Fmoc-Pro-OH、TBTU/HOBT和六氢吡啶反应，获得Fmoc-Pro-Orn(Boc)-Gly-树脂； 

然后与Fmoc-Cys(Trt)-OH、TBTU/HOBT和六氢吡啶反应，获得Fmoc-Cys(Trt)-Pro-Orn(Boc)-Gly-树脂； 

然后与Fmoc-Asn(Trt)-OH、TBTU/HOBT和六氢吡啶反应，获得Fmoc-Asn(Trt)-Cys(Trt)-Pro-Orn(Boc)-Gly-树脂； 

然后与六氢吡啶、Fmoc--Thr(tBu)-OH/TBTU/HOBt反应，获得Fmoc-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Cys(Trt)-Pro-Orn(Boc)-Gly-树脂；