[发明专利]从微生物发酵液中分离提取透明质酸的方法无效
| 申请号： | 200710043728.2 | 申请日： | 2007-07-12 |
| 公开（公告）号： | CN101089021A | 公开（公告）日： | 2007-12-19 |
| 发明（设计）人： | 谭文松;胡怡虹;张旭;蔡海波 | 申请（专利权）人： | 华东理工大学 |
| 主分类号： | C08B37/08 | 分类号： | C08B37/08;C12P19/04 |
| 代理公司： | 上海光华专利事务所 | 代理人： | 余明伟 |
| 地址： | 200237*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 微生物 发酵 分离 提取 透明 方法 | ||
1.从微生物发酵液中分离提取透明质酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将含有透明质酸的发酵液加水稀释至透明质酸的含量为0.3～0.5g/ml，然后加入氯代十六烷基吡啶；搅拌，络合；
(2)将步骤(1)的产物离心分离，收集固体络合物；
(3)加入浓度为0.4～1M的氯化钠水溶液至原发酵液体积的0.9～1.1倍，络合物解离，获得透明质酸溶液；
(4)加入乙醇，加量为：透明质酸溶液∶乙醇＝1∶2，体积比，搅拌，沉淀，得到纤维状透明质酸沉淀物；
(5)加入0.1～0.2M氯化钠至1.8～2.2倍的发酵液体积，搅拌至沉淀溶解；
(6)在溶解液中加入珍珠岩和活性炭，搅拌，过滤，得到滤液；
(7)向滤液中加入乙醇，加量为透明质酸溶液∶乙醇＝1∶1.5～2.5，体积比，搅拌后得到透明质酸沉淀；
(8)用水溶解沉淀，喷雾或真空干燥得医用级透明质酸干粉，透明质酸的分子量为1～3MD。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，氯代十六烷基吡啶与透明质酸的重量比为：透明质酸：氯代十六烷基吡啶＝1∶1.5～1∶2.5。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所说的珍珠岩选自2号珍珠岩或4号珍珠岩中的一种以上，加入量为2～4g/L，活性炭的加入量为1.5～2.5g/L。
4.从微生物发酵液中分离提取透明质酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将含有透明质酸的发酵液加水稀释至透明质酸的含量为0.3～0.5g/ml，然后加入氯代十六烷基吡啶；搅拌，络合；
(2)将步骤(1)的产物离心分离，收集固体络合物；
(3)加入0.4～1M的氯化钠水溶液至1.8～2.2倍的原发酵液体积，络合物解离，获得透明质酸溶液；
(4)在步骤(3)的溶液中加入珍珠岩和活性炭，搅拌，过滤，收集滤液；
(5)在滤液中加入氧化铝，加量为：透明质酸∶氧化铝＝1∶4～1∶8，g/g，另加入1～2g/L活性炭，搅拌，过滤，收集滤液；
(6)向滤液中加入乙醇，加量为透明质酸溶液∶乙醇＝1∶1.5～2.5，体积比，搅拌后得到透明质酸沉淀；
(7)用水溶解沉淀，喷雾或真空干燥得医用级透明质酸干粉，透明质酸的分子量为1～3MD。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，氯代十六烷基吡啶与透明质酸的重量比为：透明质酸∶氯代十六烷基吡啶＝1∶1.5～1∶2.5。
6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所说的珍珠岩选自2号珍珠岩或4号珍珠岩中的一种以上，加入量为2～4g/L，活性炭的加入量为1.5～2.5g/L。
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