[发明专利]氨苄青霉素分子印迹聚合物微球的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及的是一种化学和化工技术领域的方法，具体为一种氨苄青霉素分子印迹聚合物微球的制备方法。

背景技术

氨苄青霉素(ampicillin)为β-内酰胺类半合成广谱抗生素，于1947年首次从微生物代谢物中分离得到，对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌具有较强的抗菌作用，因而广泛用于兽医临床，是畜禽等农产品养殖中常用的抗生素类药物，氨苄青霉素在食品中的残留对人容易引起过敏反应，同时可诱导耐药菌株的产生，与四环素、氯丙嗪混合使用时，易产生沉淀反应残留在动物源性食品中，因此，动物源性食品中的青霉素残留对人类健康构成了巨大威胁，不良毒副作用主要有产生轻度恶心、呕吐、腹泻等，严重时可出现肾脏毒性等。目前，青霉素残留检测方法主要有微生物法、免疫法、色谱法等，并采用了一些联用技术。微生物法具有特异性差、灵敏度低、检出限高(＞3mg/kg)等缺点。高效液相色谱法测定动物源性食品中的药物残留必需要经过一系列样品处理过程，包括样品的提取、脱蛋白、离心、层析柱净化等。免疫法适合于一些易处理的样品(尿样、血液等)的现场、快速检测。但当样品中含有与抗生素结构相类似的其它化合物(如核苷类、肽类等)时，可能出现假阳性结果，严重影响结果判定。因此，从复杂生物基质中选择性地分离纯化目标物质的样品前处理过程在食品安全检测技术中是非常重要的。

分子印迹聚合物作为固相萃取填料是近年来分子印迹技术最具应用前途的一个领域，分子印迹在固相萃取方面的应用，主要时基于传统的固相萃取技术，如包括柱预处理、上样、淋洗、洗脱等步骤，主要集中在生物样品中物质的提取方面，特别是生物流体中样品的分析。分子印迹聚合物相对于传统的固相萃取填料，具有更高的选择性，因此，分子印迹固相萃取技术不仅用于分析物的富集，而且能有效的除去样品基质的干扰。近年来，分子印迹固相萃取技术已经成功应用于环境样品(水或土壤)、食品、植物和烟草中相关微量、痕量物质的提取。

经对现有技术的文献检索发现，目前分子印迹技术已开始应用于食品中青霉素的检测中。Urraca等在《Analytical Chemistry》(分析化学，2007，79，695-701)上发表的“Direct extraction of penicillin G and derivatives from aqueoussamples using a stoichiometrically imprinted polymer”(应用分子印迹聚合物丛水性样品中提取青霉素G及其衍生物)，提出通过化学计量合成青霉素G的分子印迹聚合物，可直接从水样中富集β-lactam抗生素。以上所述的聚合物主要是通过本体聚合法得到块状聚合物，经过研磨、筛分和沉降得到一定粒径的无定形分子印迹聚合物，因此费时、费力，产率也低。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种青霉素分子印迹聚合物微球的制备方法，具有简单、高效制备出具有良好分子识别性能的分子印迹聚合物微球优点。

本发明是通过以下技术方案实现的，本发明具体包括以下步骤：

1)配制浓度为3％～6％聚乙烯醇溶液，如：聚乙烯醇1788(市售)溶液浓度为3％～6％；

2)然后将功能单体、模板分子(即氨苄青霉素)、引发剂(即偶氮二异丁腈AIBN)、致孔剂和交联剂混合，超声，加入步骤1)中配制的聚乙烯醇1788溶液中，恒速搅拌24h；

3)反应结束后，70℃水中搅拌60min，过滤，超声振荡，依次用双蒸水洗涤2次，甲醇洗涤3次，丙酮洗涤2次，每次10min，最后通过索氏萃取法(为现有技术中的方法)除去模板分子；

4)将去除模板分子后的聚合物，50℃温度下真空干燥，得到氨苄青霉素分子印迹聚合物微球。

步骤2)中，所述的致孔剂，为二甲亚砜∶氯仿体积比＝1∶1的混合溶液。

步骤2)中，所述的功能单体，为甲基丙烯酸(MAA)，或三氟甲基丙烯酸(TFMAA)，或4-乙烯吡啶(4-VP)，或甲基丙烯酸N，N-二乙基氨基乙酯(DAM)。

步骤2)中，所述的交联剂，为乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)，或三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯(TRIM)。

步骤2)中，所述的超声，其超声时间为5min～10min。

步骤2)中，所述的恒速搅拌，其条件是温度控制在60℃～80℃之间，搅拌速度为400rpm～600rpm。

所述的1)、2)、3)、4)四个步骤，是在保持氮气气氛条件下进行的。