[发明专利]链球菌DNA疫苗pcDNA3.1－GapC及其制备方法

权利要求书

1.一种链球菌DNA疫苗pcDNA3.1-GapC，其特征在于该疫苗具有SEQ NO 3所示的碱基序列。

2.根据权利要求1所述的链球菌DNA疫苗pcDNA3.1-GapC的编码蛋白，其特征在于具有SEQ NO 4所示的氨基酸序列。

3.一种根据权利要求1所述的链球菌DNA疫苗pcDNA3.1-GapC的制备方法，其特征在于该方法为：根据停乳链球菌GapC上下游序列设计引物：

上游引物：5’-GGGGCTAGCACCATGGTAGTTAAAGTTGGTAT-3’

下游引物：5’-GGGGGTACCTCATTATTTAGCGATTTTTGCAA-3’

为了在上游引物中加入真核增强翻译序列Kozak序列(A/GCCATGG)，在ATG前加入ACC三个碱基.下游引物中加入2个连续的终止密码子；以停乳链球菌基因组DNA为模板，加入上游引物和下游引物进行PCR扩增：94℃变性5min，然后94℃30s，57℃1min，72℃1min，循环30次，72℃复性10min，得到GapC基因；然后用NheI，KpnI双酶切后，与同样用NheI，KpnI双酶切的pcDNA3.1载体连接，构建重组载体pcDNA3.1-GapC。