[发明专利]扶正化瘀植物药中虫草菌粉原料指纹图谱质量控制方法

权利要求书

1.一种扶正化瘀植物药中虫草菌粉原料指纹图谱质量检测方法，包括下列步骤：

(1)提取虫草菌丝粉

称取0.100g虫草菌粉，加入25ml纯净水，超声提取20-60min，提取液用0.23-0.45μm滤膜过滤，进样；

(2)梯度洗脱流动相

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，水和乙腈为流动相进行洗脱，色谱柱为Ace水相柱250*4.6mm，5μm，ACT；线性梯度洗脱：0-30min，0-7％乙腈，流速1.0ml/min；检测波长261nm；柱温30℃；进样量10μl；

(3)标准指纹图谱的建立

确立虫草菌粉HPLC标准指纹图谱，比较样品指纹图谱中所有峰，确定4个共有峰，选取3个特征峰，分别为2号峰尿苷，3号峰鸟苷和4号峰腺苷，均经对照品对照定性和HPLC/MS鉴定，选取含量较高的腺苷作为指标成分；

从十批样品的HPLC指纹图谱中按照以下原则选取一批虫草菌粉药材的指纹图谱作为对照指纹图谱，结合药效实验情况，选取确定疗效的虫草菌丝粉的指纹图谱，将指纹图谱和定量测定结果进行对照比较，选取含量在平均值附近的样品的指纹图谱，选取特征峰分离较好，峰的保留时间和峰高适宜、峰型较典型的指纹图谱，选取基线平稳、信噪比好的指纹图谱；

(4)指纹图谱的质量检测

a.样品真伪的鉴别

3个特征峰相对保留时间，2号峰尿苷0.44±0.03、3号峰鸟苷0.68±0.03、4号峰腺苷1.00；

b.样品质量评价

将样品的HPLC指纹图谱与对照指纹图谱进行比较，4个共有峰计算得到的相似度应不得小于0.9。

2.根据权利要求1所述的扶正化瘀植物药中虫草菌粉原料指纹图谱质量检测方法，其特征在于：所述步骤(4)在指纹图谱测定条件确定后，通过对至少三批样品进行测定，计算相关参数，提出高效液相色谱系统的适用参数条件，腺苷对照品溶液100μg/ml的色谱峰面积重现性RSD不高于3％，保留时间重现性RSD不高于2％；色谱柱柱效以腺苷的特征峰计算不少于15,000块理论塔板数。