[发明专利]成体干细胞的培养基和培养方法

说明书

技术领域

本发明属于生物工程领域，具体涉及一种成体干细胞的培养基和培养方法。

背景技术

近年来，造血干细胞移植(Haematopoietic stem cell transplantation，HSCT)已成为治疗血液系统恶性肿瘤、实体瘤、自身免疫系统疾病及某些基因缺陷疾病的重要手段，如白血病、系统性红斑狼疮、再生障碍性贫血、艾滋病等。异基因移植虽然相对来说疗效好，复发率低，但存在一定的供者来源限制，并易发生严重的移植物抗宿主病，死亡率高。虽然脐血干细胞移植具有来源丰富、抗原性弱、移植后并发症少等优点，但又存在数量不足的缺陷，造成了成人移植的限制。为得到治疗所需的细胞数量，许多科学家试图通过不同手段对HS/PCs进行规模化扩增。但是目前常用的方法扩增HS/PCs(Haematopoietic Stem/Progenitor Cells)的效率十分有限，而且HS/PCs在体外扩增的过程中自我更新能力下降并显示出分化的特征，导致其归巢和长期造血重建能力的降低，所以从根本上解决HSCT面临的供体严重短缺已成为亟待解决的问题。尽管人们已研究发现了很多扩增方法，如不同细胞因子的组合，基质滋养层支持等，可使细胞数量得到很大程度的扩增，但经历了数周甚至更长时间的液体扩增培养后，HS/PCs的临床应用价值尚值得商榷。

目前国内外采用不同细胞因子的组合方案所扩增的HS/PCs存在诸如扩增时间短、倍数低、扩增体系难于调控、扩增后细胞的自我更新能力及造血重建功能下降等问题，严重影响移植效果。如在使用FL(FMS-like tyrosine kinase 3 ligand，Flt3配体)、KL(Stem cell factor，c-KitLigand，干细胞因子)、TPO(Thrombopoietin，促血小板生成素)、IL-3(Interleukin-3，白细胞介素-3)、IL-6(Interleukin-6，白细胞介素-6)的组合对HS/PCs进行有效扩增的同时，随着液体培养时间的延长，尽管细胞数量得到了很大的扩增，但CD34⁺细胞所占的比例也逐渐的下降甚至消失，其自我更新能力会逐渐下降，HS/PCs也不可避免地发生了分化，最终也就丧失了其治疗效用。

从成本来看，细胞因子作为一种蛋白，它的诱导、表达、纯化均需耗费较大的精力和经济成本，且在储存过程中较易分解而失去活性。各种支持生长的滋养层细胞虽然不存在“降解”问题，但它们的获得相对较困难，且易发生交叉污染。所以寻找一种更经济、更简易、更安全的HS/PCs扩增方法是我们急需解决的问题。