[发明专利]一种检测毒物代谢遗传风险的试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及分子生物学和医学领域，更具体的，本发明涉及一种检测毒物代谢遗传风险的试剂盒，通过同时检测细胞色素P450 1A1(CYP1A1)、谷胱甘肽硫转移酶M1(GST M1)、谷胱甘肽硫转移酶T1(GST T1)、谷胱甘肽硫转移酶P1(GST P1)上的多态性位点基因型来评估个体毒物代谢遗传风险。

背景技术

在品种繁多的化学品中，有许多系有毒化学物质，可能带来环境污染。在正常生理状况下，人体内的物质代谢可产生少量的毒物，如氨基酸分解代谢产生的氨，血红蛋白分解产生的胆红素等。此外，还有从体外通过吸收进入人体内的毒物，如肠内细菌作用使食物中蛋白质腐败而产生的坡类、硫化物、酚等被吸收入血。许多药物都是进入体内后需要解毒的，如冬眠灵、苯妥英纳，水合氯醛、异烟肼等等。无论是外来的毒物，抑或体内产生的毒物，人体都必须及时地进行处理，并迅速地将其排出体外，才能维持身体健康。毒物分解代谢能力缺陷，可以导致多种疾病的易感，而其中最主要、对人体影响最大的，就是肿瘤。

我国自上世纪70年代以来，癌症发病及死亡率一直呈上升趋势，在城镇居民中癌症已经成为死因的首位。随着社会条件的发展，我国在肝癌、胃癌高居不下的同时，肺癌、结直肠癌及乳腺癌等又出现了显著上升趋势，从而进一步加大防治的难度。癌症不仅影响劳动力人口健康，也是医疗费用上涨的重要因素。目前到医院来看病的病人如果被确诊为肺癌，有80％已经是晚期，而且有些已经开始转移。所以如何能使癌症的一级病因学预防、重点地区重点人群的二级预防和临床的三级预防结合在一起更显得重要。

毒物代谢相关疾病是遗传易感性和环境因素相互作用的结果。与毒物代谢相关的基因主要为细胞色素P450 1A1(CYP1A1)、谷胱甘肽硫转移酶M1(GST M1)、谷胱甘肽硫转移酶T1(GST T1)、谷胱甘肽硫转移酶P1(GST P1)。

CYP1A1能代谢活化多种环境致癌物，致突变物，其遗传多态性与多种癌症的易感性有关。因此，许多研究者倾向于将新化合物对CYP1A1的诱导能力作为评价其致癌性的重要指标。Ile/Val多态性为CYP1A1第7外显子第4889bp的A被置换为G后导致所合成蛋白产物的第462位氨基酸的IIe为Val所置，该变异导致酶的活性增加。1998年，Sugimura H和Wakai K对日本冲绳、东京、中国江苏、高加索等人群中的247例肺癌病例和185例健康对照的研究中发现：CYP1A1 Ile462Val Val/Val基因型与肺癌发生存在显著关联，风险度为(OR＝3.32，P＝0.013)。2003年，Sobti RC和Sharma S对北印度地区人群中的肺癌病例以及健康对照的研究中发现：CYP1A1 Ile462Val Val/Val的肺癌发生风险度为2.68，小细胞肺癌(SCLC)风险度为4左右。2004年，Liang GY和Pu YP等人对南京汉族人群中152例原发性肺癌病例和152例健康对照的研究中发现：CYP1A1基因上的多态现象与肺鳞癌发生有显著关联，变异杂合体与变异纯合体的肺鳞癌风险度为(OR＝2.31，95％CI＝1.23-4.36)。另外，还有研究提示，CYP1A1多态性与膀胱癌、腺癌、食管癌及前列腺癌的易感性有关。

谷胱甘肽硫-转移酶(GSTs)能催化还原型的谷胱甘肽(GSH)的巯基(-SH)结合到疏水的化合物上，使亲电子的化合物变成亲水的物质，易于从胆汁或尿液中排泄，将体内各种有潜在毒性的物质及亲脂性化合物降解排出。某些GSTs同功酶含有非硒依赖性谷胱甘肽过氧化酶活性。能清除脂类自由基，有抗脂质过氧化的作用。GSTs在机体有毒化合物的代谢、保护细胞免受急性毒性化学物质攻击中起到重要作用。此外，亲电子致癌物可被GSTs解毒，致突变剂与DNA大分子共价结合能激发某些肿瘤的形成，所以GSTs有抑制细胞癌变的功能。到目前为止，GST的4种基因，即GST M1、GST M3、GST T1和GST P1已证实具有多态性，基因的多态性可引起酶活性的改变，导致对潜在致癌物代谢能力的差异，这种差异是构成个体肿瘤易感性的遗传基础之一。