[发明专利]一种 N－芴甲氧羰基－N－三苯甲基－D－谷氨酰胺的合成法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种N-芴甲氧羰基-N-三苯甲基-D-谷氨酰胺(Fmoc-D-Gln(Trt)-OH)的合成方法。

背景技术：

N-芴甲氧羰基-N-三苯甲基-D-谷氨酰胺是固相接肽中常用的试剂，我们可以通过较简单的方法以D-谷氨酰胺为初始原料来合成(ref：Tetrahedron Lett；EN；32；6；1991；739-742)，即Z-D-Gln-OH经三步反应得到产物，但由于产率比较低且D-Gln原料市场价格昂贵，而D-Glu价格则相对便宜很多，于是我们从这个角度出发研发了这种合成方法。Fmoc-Gln (Trt)-OH结构式为：

发明内容：

本发明的目的是提供一种N-芴甲氧羰基-N-三苯甲基-D-谷氨酰胺的合成法。解决目前采用D-谷氨酰胺合成成本较高的问题。技术方案具体包括如下步骤：

1.D-谷氨酸与Z-Cl(苄氧羰基氯)反应得到Z-D-Glu-OH(N-苄氧羰基-D-谷氨酸)，Z-D-Glu-OH在有机溶剂N，N-二甲基甲酰胺中，在三乙胺，溴苄的存在下，选择性的保护α-羧基，得到Z-D-Glu-OBzl(N-苄氧羰基-D-谷氨酸苄酯)。

2.Z-D-Glu-OBz l在有机溶剂中，加入三乙胺、氯甲酸乙酯、氨水(摩尔比：1∶1∶2~6)，在-20~20℃反应6~24小时后得到Z-D-Gln-OBzl(N-苄氧羰基-D-谷氨酰胺苄酯)。有机溶剂为四氢呋喃或乙酸乙酯；

3.Z-D-Gln-OBzl的醋酸溶液在浓硫酸催化下与三苯甲醇反应，在45~60℃反应8~24小时得到Z-D-Gln(Trt)-OBzl(N-苄氧羰基-N-三苯甲基-D-谷氨酰胺苄酯)；

4.Z-D-Gln(Trt)-OBzl氢化脱去Z基团和Bzl基团，得到D-Gln(Trt)-OH(N-三苯甲基-D-谷氨酰胺)。脱去Z-、Bzl-保护用10％钯碳、5％钯碳中的一种和氢气、环己烯中的一种；

5.D-Gln(Trt)-OH上Fmoc保护基得到Fmoc-D-Gln(Trt)-OH(N-芴甲氧羰基-N-三苯甲基-D-谷氨酰胺)。用Fmoc-Cl(芴甲氧羰酰氯)或Fmoc-Osu(芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺)作为上保护试剂。

本发明中一些常用的缩写具有以下含义：

Fmoc：芴甲氧羰基

Z-：苄氧羰基

Trt-：三苯甲基

BrBzl：溴苄

OBzl：苄酯

Glu：谷氨酸

Gln：谷氨酰胺

DMF：N，N-二甲基甲酰胺

ClCOOEt：氯甲酸乙酯

Et₃N：三乙胺

NH₃.H₂O：氨水

Pd/C：钯/碳

Z-D-Glu-OH：N-苄氧羰基-D-谷氨酸

Z-D-Glu-OBzl：N-苄氧羰基-D-谷氨酸苄酯

Z-D-Gln(Trt)-OBzl：N-苄氧羰基-N-三苯甲基-D-谷氨酰胺苄酯

D-Gln(Trt)-OH：N-三苯甲基-D-谷氨酰胺

Fmoc-D-Gln(Trt)-OH：N-芴甲氧羰基-N-三苯甲基-D-谷氨酰胺

合成路线如下：

a)Z-Cl/NaOH，0℃→rt，35h90％；

b)Et₃N，BrBzl，DMF，rt，24h

(ref：Recl.Trav.Chim.Pays-Bas；EN；83；1964；199-207)

c)ClCOOEt/ET₃N，NH₃.H₂O，THF，-20~25℃

本发明的有益效果是：利用低价原料D-谷氨酸来合成D-谷氨酰胺衍生物，可以较大降低生产成本。

具体实施方式：

以下将参照实例对本发明作进一步的详细描述，但本发明不限于这些具体实例。