[发明专利]星果藤的组织培养繁殖方法无效
| 申请号: | 200710030594.0 | 申请日: | 2007-09-28 |
| 公开(公告)号: | CN101138319A | 公开(公告)日: | 2008-03-12 |
| 发明(设计)人: | 吴坤林;段俊;曾宋君;陈之林;郑枫;简曙光 | 申请(专利权)人: | 中国科学院华南植物园 |
| 主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00;C12N5/04;A01G31/00 |
| 代理公司: | 广州科粤专利代理有限责任公司 | 代理人: | 潘伟健 |
| 地址: | 510650广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 星果藤 组织培养 繁殖 方法 | ||
1.星果藤的组织培养繁殖方法,其特征包括以下的步骤:
(1)外植体诱导材料消毒和不定芽诱导:在生长季节选取生长健壮的星果藤(Tristellateia australasiae A.Richard)植株基部萌发出来的幼嫩小芽为外植体,用水冲洗干净后先用70%~75%的酒精浸泡10~30s,再用0.1%~0.2%升汞溶液或1%~2%的次氯酸钠溶液消毒10~15min,无菌水冲洗后切下带生长点的顶芽或带节的茎段,接种到培养基中,在温度(28±2)℃,光照度1500~2000lx,光照8~12h/天,培养形成不定芽,所述的培养基每升含有6-苄基嘌呤0.1~0.5mg,吲哚丁酸0.01~0.05mg,蔗糖25~30g和琼脂5~7g,其余为MS,pH5.8~6.0;
(2)不定芽的继代增殖:将步骤(1)诱导出的不定芽切割后再继代培养于与步骤(1)相同的培养基中,在温度(28±2)℃,光照度1500~2000lx,光照8~12h/天进行不定芽的增殖;
(3)生根培养:当步骤(2)芽高约2~3cm时,切下接种到生根培养基中,在温度(28±2)℃,光照度1500~2000lx,光照8~12h/天培养至正常生根,所述的培养基每升中含有吲哚丁酸0.5~1.0mg和活性炭0.05~0.1g,蔗糖25~30g和琼脂5~7g,其余为MS,pH5.8~6.0;
(4)试管苗移栽:步骤(3)的生根试管苗长至3~5cm时,在自然光照下炼苗7~10天,洗净根部培养基,移栽到蛭石和泥炭土和珍珠岩等量混合而成的基质中,喷雾保湿85%~95%、遮荫75%~85%、保温20~30℃培养。
2.根据权利要求1的星果藤的组织培养繁殖方法,其特征是步骤(1)所述的无菌水冲洗次数为4~5次,先培养25~30天后再转入同前的新鲜培养基中,在培养材料基部切一新切口,继续培养25~35天能在外植体上形成不定芽;步骤(2)中的一个继代增殖周期为30~35天;步骤(3)所述的培养时间是10~15天,步骤(4)中移栽40~50天后上盆栽培。
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