[发明专利]固定化微生物制剂及用其降解养殖水体孔雀石绿污染的方法

权利要求书

1.一种固定化微生物制剂，其特征在于以海藻酸钙为载体，以泛菌(Pantoea sp.)M3菌株为有效成份。

2.如权利要求1所述的固定化微生物制剂，其特征在于泛菌(Pantoea sp.)M3的重量含量为0.188％～0.375％。

3.权利要求1至2所述固定化微生物制剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

1)将菌种M3接入富集培养培养基，在30～37℃、150rpm下培养18～30h，离心，磷酸缓冲液洗涤，得到浓缩菌悬液备用；

2)取海藻酸钠加入水调成糊状，加热溶解并冷却至室温，再加入浓缩菌悬液，混合均匀，最终混合物海藻酸钠的重量浓度为2％，菌含量为1～2g/L，余量为水；

3)取混合物以恒定的速度滴到盛有5％CaCl₂溶液中，形成海藻酸钙小球，4～8℃温度下胶联固定16h；

4)海藻酸钙固定化小球用磷酸盐缓冲液洗涤后即得最终的固定化微生物制剂。

4.如权利要求3所述固定化微生物制剂的制备方法，其特征在于步骤1)中的富集培养基配方为：1000ml中：葡萄糖5g；KH₂PO₄1g；K₂HPO₄1g；NH₄NO₃1g；MgSO₄·7H₂O10mg；CaCl₂0.5mg；酵母浸膏5g；  蛋白胨10g；调pH至7.0～7.5。

5.如权利要求3所述固定化微生物制剂的制备方法，其特征在于步骤1)的培养方法是121℃、103kPa、湿热灭菌20min后，接种，培养温度：30～37℃；最适pH：7.0～7.5，培养时间18～30小时。

6.如权利要求3所述固定化微生物制剂的制备方法，其特征在于步骤3)中海藻酸钙小球的成球直径为2～3mm。

7.如权利要求3所述固定化微生物制剂的制备方法，其特征在于步骤1)和步骤4)中用磷酸盐缓冲液洗涤的次数为2-3次。

8.如权利要求3所述固定化微生物制剂的制备方法，其特征在于步骤4)制得的终固定化微生物制剂中泛菌(Pantoea sp.)M3的重量含量0.188％～3.75％。

9.权利要求1至8所述终固定化微生物制剂用于修复水体去除孔雀石绿的方法，其特征在于取固定化微生物制剂，按底泥干重的1％～10％直接添加到孔雀石绿含量为0.45～2.10μg/g干重、含水率在91.55～95.77％的底泥中，25～30℃室温降解4～12天。