[发明专利]灰毡毛忍冬次皂苷乙的制备方法及其治疗肝癌、乳腺癌、子宫颈癌的应用

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体为灰毡毛忍冬次皂苷乙的制备方法，及其在医药领域中的用途，尤其是在制备预防和治疗肝癌、乳腺癌、子宫颈癌药物方面的应用。

背景技术

肿瘤是一大类严重威胁人民生命和健康的多发病及常见病，全世界每年有700万人发生肿瘤，500万人被肿瘤夺去生命，现有肿瘤患者在1000万人以上。在我国肿瘤越来越成为严重的健康卫生问题，解放初期，肿瘤仅占人口死因的第九位或第十位，到70年代，已上升到第三位，目前估计，全国每年肿瘤发病人数约160万，全国每年死于肿瘤病的人数已达130万人，并且仍有上升趋势，其正在超过心血管疾病而成为人口死亡的第一原因。因此，世界各国都高度重视肿瘤的防治研究。当今，手术治疗、放射治疗、化学药物治疗仍然是最常用最重要的肿瘤治疗手段。但是化学药物治疗存在着很大的缺点，这主要是现有的抗肿瘤药物对肿瘤细胞的选择性抑制不强、全身用药毒性较大、且大部分具有免疫抑制作用，这在一定程度上限制了它的使用。随着青蒿素、紫杉醇等一系列具有良好活性天然产物的发现和成功应用，世界各国越来越将目光转向在天然植物中寻找新的药物来源。通过多年的努力亦成功发现了一些抗癌活性成分，为进一步开发高效低毒的抗肿瘤药物奠定了基础。但目前发现的天然抗癌活性成分，均因在植物体中为微量成分，故成药价格高，难以普及应用，如何开发高效价廉的抗肿瘤药物仍是一项极为紧迫而重要的全球性课题。

灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides Hand.-Mazz.为忍冬科Caprifoliaceae忍冬属植物，2005版中华人民共和国药典收载，列入山银花项下。忍冬属植物含有大量的皂苷，主要为常春藤型和齐墩果酸型皂苷。现代药理研究证明，常春藤型皂苷皂苷具有保肝、抗癌活性。从其中分离得到的灰毡毛忍冬次皂苷含量较大，药理作用明确，具有极好的开发利用前景。

发明内容

本发明者致力于从天然产物中寻找更安全更有效的天然肿瘤抑制剂，经过活性筛选，初步选定灰毡毛忍冬总皂苷活性提取物部位，申报了发明专利，后在此基础上，进一步筛选其中抗癌活性最高的化合物，发现灰毡毛忍冬次皂苷乙抗肿瘤活性最高，从而完成了本发明。本发明的目的是要提供具有抑制肿瘤功能的灰毡毛忍冬次皂苷的制备方法，为研制开发抗肿瘤新药提供新的天然活性物质来源。

本发明所采用的技术方案如下：

本发明涉及一种灰毡毛忍冬次皂苷乙的制备方法及其治疗肝癌、乳腺癌、子宫颈癌的应用：

a.总皂苷制备：灰毡毛忍冬花及花蕾，用浓度为40％-90％的乙醇提取3次，合并提取液，用0.1-5％的药用活性碳脱色，过滤，回收乙醇后，将药液拌样或直接上大孔树脂柱(HP20、D101、AB-8、HPD100、HPD300)或聚酰胺柱，先用水及20％乙醇洗涤柱，再用30％-90％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇至浓浸膏，得总皂苷；

b.总皂苷降解：总皂苷浓浸膏，加入1％-10％NaOH或KOH溶液，在50-100℃下降解2-4小时，加1-10％盐酸或硫酸调节PH值到7，放冷后滤取不溶物，用60-95％乙醇或甲醇溶解后加0.1-5％的药用活性碳脱色，过滤，减压回收溶剂，放置，析晶，过滤，干燥，即得灰毡毛忍冬次皂苷乙。

c..以a和b制备方法所得到的灰毡毛忍冬次皂苷乙，可在制备预防与治疗肝癌、乳腺癌、子宫颈癌药物中应用。

本发明所述的灰毡毛忍冬次皂苷乙，经药理学、药效学和大量的动物实验研究证明，具有抗肿瘤作用；在体外实验中，显著抑制肿瘤MDA-MB-231、Hela、HepG₂、IA-9、MCF-7、U-87-MG、CAKI-1、PC-3、KB、KB-VIN、A-549、SK-OV-3、SK-MEL-2、HCT-15细胞增殖；在体内实验中，对小鼠肝H₂₂实体瘤、小鼠乳腺癌MA737、U₁₄荷瘤小鼠肿瘤、Lewis肺癌，能抑制肿瘤的生长，增长荷瘤小鼠免疫力及生存期。

本发明灰毡毛忍冬次皂苷乙可以制备成片剂、胶囊剂、颗粒剂、冲剂、散剂、丸剂、口服液、糖浆剂、混悬剂、喷雾剂和注射剂等。在上述制剂中，有效剂量的本发明提取物可以单独或与药学尚可接受的载体：赋形剂、崩解剂、润滑剂、着色剂等组成混合物。

灰毡毛忍冬次皂苷乙的结构见下式：

具体实施方式