[发明专利]双N－奶牛隐性乳房炎快速诊断试剂盒

说明书

一、技术领域

本发明为一种奶牛隐性乳房炎的快速诊断试剂盒，定名为“双N-奶牛隐性乳房炎快速诊断试剂盒”，专用于奶牛隐性乳房炎诊断。

二、技术背景

在一个牛群中，大多数乳房炎是隐性型的，由于无临床症状，肉眼很难判断。隐性乳房炎的危害主要体现为：(1)隐性乳房炎造成的泌乳母牛产奶量的损失占总生产能力的10％～15％；(2)隐性乳房炎牛易于转变为临床乳房炎；(3)隐性乳房炎牛所产乳汁中含有大量的炎性因子、病原微生物及其产生的毒素，可能危害牛奶消费者的身体健康。

目前，国内外监测隐性乳房炎的方法有：(1)直接(牛奶)体细胞计数法，这是监控奶牛隐性乳房炎的可靠手段。但是，测定牛奶体细胞数，如果用仪器测定，一台体细胞测定仪的价格达40～60万元左右；用显微镜(人工)测定，则要对牛奶进行特殊处理，并对每个乳样进行观察计数，费时费力，且可靠性不高。(2)间接体细胞计数法，现在大多采用“加州乳房炎检测法”，该方法对于隐性乳房炎检测具有较好的效果，便于早期发现，但该技术的知识产权是国外的，且检测费用较高(每头奶牛每次检测材料费用0.3～0.5元人民币左右)；国内在加州乳房炎检测法的基础上衍生了一些检测方法，如兰州乳房炎检测法(LMT)、杭州乳房炎检测法(HMT)和上海乳房炎检测法(SMT)，但同样存在检测成本较大，且不适用于泌乳后期奶牛等问题，几乎在奶牛场没有应用。(3)其他检测方法，主要根据隐性乳房炎奶牛的乳汁中Na离子或Cl离子等浓度的变化，或根据乳汁酶含量的变化，而设计的乳汁pH检测、乳汁电导率检测、乳汁酶检测方法等，但这些检测方法需要采集乳样到实验室测定，且需具备特定的仪器，而不能用于现场检测。

三、发明内容

技术问题  本发明的目的是提供一种新型的奶牛隐性乳房炎的诊断试剂盒，此诊断试剂盒检测奶牛隐性乳房炎，符合率高，而且简便，成本低廉，测定结果不受季节、环境温度、奶牛泌乳期、饲养地区及日粮中不同食盐添加量的影响。

技术方案

双N-奶牛隐性乳房炎快速诊断试剂盒，其特征在于，

试剂A：

每10ml处方量含：硝酸银1.2920g，去离子水10ml

试剂B：

每10ml处方量含：铬酸钾0.9990g，去离子水10ml

上述双N-奶牛隐性乳房炎快速诊断试剂盒还可含有试剂C：100ml去离子水。

上述的双N-奶牛隐性乳房炎快速诊断试剂盒的制备方法，包括：

将1.2920g硝酸银溶解于3～5ml去离子水中，并用去离子水定容至10ml，无菌密封包装于棕色试剂瓶中，并用黑色纸包裹，此即为试剂A；

将0.9990g铬酸钾溶解于去离子水中，并用去离子水定容至10ml，无菌密封包装于棕色试剂瓶中，此即为试剂B；

试剂A和试剂B组合成“双N-奶牛隐性乳房炎快速诊断试剂盒”，于阴凉干燥处保存，试剂C为去离子水，对于没有去离子水的使用者选配，用于在测定前对试剂A进行稀释。

有益效果

本发明为一种新型的奶牛隐性乳房炎的诊断试剂盒，定名为“双N-奶牛隐性乳房炎快速诊断试剂盒”，专用于奶牛隐性乳房炎诊断。本试剂盒不但达到了与国外“加州隐性乳房炎检测法”有高的符合率(阳性符合率为90％以上)，而且经与体细胞计数法比较，证明其可靠性更高，能准确反应牛奶体细胞含量，且具有不受季节、温度、奶牛泌乳期、奶牛饲养地区及日粮中不同食盐添加量的影响，并同时具有快速、准确、简便、价廉等优点，每一个奶牛乳汁样本的检测试剂盒成本仅0.02元。

四、具体实施方式

本发明是一种用于奶牛隐性乳房炎诊断的新型快速检测试剂盒组合。“双N”的含义是技术发明者的单位名称“南京农业大学”中的英文首字母“N”和试剂盒的主要成分“硝酸银”中的英文字母“N”的组合。

(一)试验盒研制

1.牛奶中氯离子浓度与奶牛隐性乳房炎的关系