[发明专利]一种红花籽粕活性物质5－羟色胺衍生物的提取方法

说明书

技术领域

一种红花籽粕活性物质5-羟色胺衍生物的提取方法，属于红花籽的综合开发利用。

背景技术

红花籽是传统中药红花的种籽，我国红花的栽培历史悠久，红花资源丰富，品种繁多，分布甚广，最主要的产地是新疆、四川、云南、河南、浙江。新疆是我国最大的红花产区，新疆红花油亚油酸含量高达83.7％，种植面积及产量均占全国红花的80％以上，是我国红花的集中产地。红花籽粕中含有0.5％～1.0％左右的5-羟色胺衍生物，目前从其中发现了7～8种5-羟色胺衍生物，含量最多的是阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺。这类5-羟色胺衍生物都具有较强的抗氧化性，香豆酰5-羟色胺还可以促进成纤维细胞增殖，并且是一种很好的抗炎药物。另外，5-羟色胺衍生物在化妆品、工程树脂等领域中用作UV吸收剂的开发也极具潜力。关于从红花籽粕中提取5-羟色胺衍生物，日本、韩国有了一定的研究。国内对5-羟色胺衍生物的相关研究非常少，有关红花籽粕中5-羟色胺衍生物的提取、纯化和应用等方面内容鲜见报道。

红花籽粕中5-羟色胺衍生物的主要结构式如下

1、阿魏酰5-羟色胺：R′＝OCH₃ R＝H    2、香豆酰5-羟色胺：R′＝H R＝H

发明内容

本发明的目的是提供一种红花籽粕活性物质5-羟色胺衍生物的提取方法，采用溶剂提取法和溶剂分液萃取法提取5-羟色胺衍生物。

技术方案：一种红花籽粕活性物质5-羟色胺衍生物的提取方法，是以红花籽粕为原料，采用溶剂提取法对红花籽粕进行提取，结合采用分液萃取法通过异辛烷、正己烷和乙酸乙酯三步进行分液萃取得到5-羟色胺衍生物粗品，通过紫外分光光度法快速简便地测定了红花籽粕中5-羟色胺衍生物总量。

工艺为：以红花籽粕为原料，采用溶剂提取法提取，提取的工艺条件为：原料粒度为40-60目，提取溶剂为95％乙醇，液料比：溶剂∶红花籽粕(mL/g)为8～15∶1，温度为60～75℃，进行搅拌回流提取，时间为2～4小时，提取结束后抽滤，将滤液于旋转蒸发仪上蒸干；

然后经过甲醇和异辛烷分液萃取，甲醇和异辛烷的体积比为2∶1，甲醇的体积用量为20mL/g红花籽粕，取甲醇相；蒸干后加入80％甲醇和正己烷分液萃取，80％甲醇和正己烷的体积比为2∶1，甲醇的体积用量为20mL/g红花籽粕，取80％甲醇相；蒸去甲醇后加入乙酸乙酯和水分液萃取，乙酸乙酯和水的体积比为2∶1，乙酸乙酯体积用量为10mL/g红花籽粕，取乙酸乙酯相，蒸干得到5-羟色胺衍生物粗品，并建立了5-羟色胺衍生物紫外分光光度的定量分析方法。

所建立的紫外分光光度的定量分析方法，在322nm下以阿魏酸作为标准物质，回归方程为A＝14.254C-0.0515，R²＝0.9993，加样平均回收率为98.34％，精密度变异系数CV＝0.407％。

紫外分光光度法定量分析

通过溶剂萃取分液得到5-羟色胺衍生物粗提物，分析5-羟色胺衍生物的紫外特性，发现阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺在322nm左右有最大吸收峰，这和阿魏酸的紫外吸收类似，另外其他几种衍生物在322nm也均有吸收。阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺占红花籽粕中5-羟色胺衍生物总量的近80％，以这两种含量最大的5-羟色胺衍生物的紫外吸收为标准，采用紫外分光光度法基本可以定量出总量的多少。相关研究表明，在322nm时，杂质对红花籽粕中几种5-羟色胺衍生物的紫外吸收影响比较小，并且红花籽粕中原含有的5-羟色胺等杂质在溶剂萃取过程中得到初步分离，对最终结果的干扰也较小。因此，在322nm下以阿魏酸作为标准物质，用紫外分光光度法来定量5-羟色胺衍生物的总量，可用来衡量从红花籽粕中提取5-羟色胺衍生物工艺的优化程度，其线性回归方程为A＝14.254C-0.0515，R²＝0.9993，加样平均回收率为98.34％，精密度变异系数CV＝0.407％。

本方法除了对过程中溶剂分液萃取进行严格控制外，主要对溶剂种类、提取时间、提取温度、料液比、原料粒度进行研究，以确定提取条件。

本方法5-羟色胺衍生物提取含量＞27μmol/g粕。