[发明专利]降解石油污染物及石油产品的固体微生物菌剂及制备方法

权利要求书

1、多食鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium multivolum)，菌种保藏号是CGMCC No.1951。

2、一种用于石油污染物及石油产品降解的固体微生物菌剂，是由保藏号是CGMCCNo.1950的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtillus)和权利要求1的多食鞘氨醇杆菌的一级种子液按体积比0.5～2:1混合发酵而得的混合细菌发酵液与草炭土按重量比例0.1～1:1混合制成。

3、如权利要求2所述的固体微生物菌剂，其中枯草芽孢杆菌的有效活菌数为10⁶～10¹⁰个/ml，多食鞘氨杆菌的有效活菌数为10⁷～10¹²个/ml。

4、一种固体微生物菌剂的制备方法，将枯草芽孢杆菌和多食鞘氨醇杆菌的混合细菌发酵液与草炭土按重量比例0.1～1:1混合，其中，所述的枯草芽孢杆菌和多食鞘氨醇杆菌的混合细菌发酵液的制备，步骤如下：

(1)菌种

枯草芽孢杆菌，保藏号：CGMCC No.1950，

多食鞘氨醇杆菌，保藏号：CGMCC No.1951，

(2)一级种子液

将上述菌种分别在牛肉膏蛋白胨斜面培养基上活化16～32h后，转接到液体LB培养基或牛肉膏蛋白胨培养基内摇瓶活化16～32h，作为一级种子液，

(3)混合细菌发酵液

将上述两菌的一级种子液枯草芽孢杆菌与多食鞘氨醇杆菌按体积比0.5～2:1，总接种量2％～10％转接到发酵培养基内摇床培养16～32h，转速为150～250rpm，培养温度为20～30℃。

5、如权利要求4所述的固体微生物菌剂的制备方法，其特征在于所述步骤(3)中的发酵培养基所选用的碳源是玉米淀粉、氮源是豆粕粉。

6、如权利要求4所述的固体微生物菌剂的制备方法，其特征在于所述步骤(3)中的发酵培养基还有酵母粉。

7、如权利要求4所述的固体微生物菌剂的制备方法，其特征在于所述步骤(3)中的发酵培养基如下：豆粕粉为2～6g，玉米淀粉为1～3g，酵母粉为1～3g，K₂HPO₄ 0.11g，CaCl₂0.01g，MgSO₄·7H₂O 0.15g，MnSO₄ 0.01g，蒸馏水100ml。

8、权利要求2所述的固体微生物菌剂的应用，在用于石油污染物及石油产品污染场地进行降解处理。

9、如权利要求8所述的固体微生物菌剂的应用，其中还添加有表面活性剂和水，搅拌均匀，洒在污染场地。