[发明专利]含O型口蹄疫病毒IRES RNA的病毒样颗粒与制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种病毒样颗粒，尤其是涉及一种可在RNA病毒检测中应用的含O型口蹄疫病毒IRES RNA的病毒样颗粒及其制备方法。

背景技术

RNA病毒是以RNA为遗传物质的病毒，例如禽流感病毒、口蹄疫病毒和SARS病毒等。因为这些RNA病毒具有严重的危害性，所以其快速准确的检测就显得至关重要。检测RNA病毒常用的方法有传统的病毒分离试验、血凝抑制试验、病毒中和试验和酶联免疫吸附试验(ELISA)等，以及分子生物学检测技术如核酸依赖的扩增技术(NASBA)(Romano J W，Will-iams K G，Shurtliff R N，et al.NASBA technology：isothermal RNA amplification in qualitativeand quantitative diagnostics[J].Immunol.Invest，1997，26(1-2)：15-28)、常规RT-PCR、实时RT-PCR技术和PCR-ELISA技术等。其中实时荧光PCR是近几年发展起来的新检测技术，具有分析灵敏度高和简便快捷等方面的优点，在RNA病毒快速诊断中优势明显(Spackman E，Senne D A，Bulaga L L，et al.Development of real-time RT-PCR for the detection of avianinfluenza virus.Avian Dis，2003，47(3Suppl)：1079-1082；Heid C A，Stevens J，Livak J K，et al.Real time quantitative PCR[J].Genome Res，1996，6(10)：986-994)。

RNA病毒在PCR基础上的定性和定量检测中，影响因素较多，如实验人员测定操作中的随机误差、扩增仪孔间温度的差异、标本核酸提取后抑制物的残留、待扩增靶核酸的浓度和逆转录的效率及试剂的问题等，这些因素均可能会影响PCR扩增的效率，进而造成结果的偏差，甚至假阴性的结果，所以RNA病毒的PCR测定必须使用质控品和标准品，才能保证结果的可靠性。传统的RNA病毒扩增检测的质控品和标准品有两种：一种为裸露的RNA或者原病毒颗粒，另一种为体外转录cDNA。前者容易被广泛存在的核糖核酸酶降解且具有传染性，后者不能反应样品提取和逆转录过程对测定的影响。