[发明专利]芽孢杆菌PB6在预防或治疗胃肠道疾病及免疫相关疾病中的用途

说明书

本申请要求2005年11月29日申请的美国专利申请系列号No. 60/740,518的优先权。

发明背景

本发明一般性涉及给予细菌以治疗胃肠道疾病，更特别涉及给予 解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)菌株治疗抗生素相关性 腹泻(AAD)和艰难梭菌(Clostridium difficile)相关性疾病(CDAD)。

术语“抗生素相关性腹泻”是指在使用抗菌剂之后的良性、自限 性腹泻。典型地，这种腹泻未鉴别出病原体，腹泻是由于肠道菌群的 组成和功能改变所致。大多数患者响应于支持措施和停用抗生素。

长期应用多种抗生素、特别是应用肠道吸收较差或高度胆汁分泌 的广谱抗生素，导致肠道菌群的组成和功能发生变化，因此导致AAD 高发^1，2。肠道菌群的组成及功能变化的程度受正常菌群抵抗建群的能 力及所用抗生素类型的影响。结肠厌氧性菌群的减少干扰碳水化合物 和胆汁酸的代谢，可以发生渗透性或分泌性腹泻。由于微生物和代谢 的改变而导致机会病原体过度生长。

艰难梭菌是一种厌氧性革兰氏阳性杆菌，占所有AAD的15％ -20％。特别地，这种生物体在具有肠炎的AAD病例及在所有具有伪 膜的那些病例中可以大量分离到。其在自然环境中广泛存在，可以存 活相当长的时间，经粪-口途径传播至易感人群。据信其是婴幼儿正 常菌群的一部分，且可以在大约5％健康成人及直至1/3的无症状或 群居的住院患者中分离。

AAD的临床表现可以是从轻度腹泻至暴发性肠炎³。艰难梭菌 肠炎的严重性看来受许多因素影响，包括年龄、并存疾病、宿主免疫 应答及降低肠蠕动剂的应用。令人感兴趣地，细菌基因型和毒素产生 看来起很小作用⁴。所述疾病的主要症状是腹泻，通常在治疗期间发 生，但是在停止应用抗生素之后8周仍可以出现。在大多数AAD病 例中，患者具有稀便、轻度肠炎症状，无全身症状。所述腹泻对支持 措施和停止应用抗生素迅速作出响应。

艰难梭菌在1935年首次阐述⁵，但是直至二十世纪七十年代后 期才将其与抗生素相关性腹泻联系起来。艰难梭菌是一种形成孢子的 革兰氏阳性厌氧杆菌，产生至少两种外毒素：毒素A(主要是肠毒素) 和毒素B(主要是细胞毒素)。该生物体在人体中导致胃肠道感染，从 无症状建群至严重腹泻、伪膜性肠炎(PMC)、中毒性巨结肠、结肠穿 孔及死亡^6，7，8。产生艰难梭菌建群的第一步是结肠的正常菌群破坏， 通常是由于抗生素所致，或者罕见地由于抗肿瘤或免疫抑制剂引起 ^9，10。建群通过粪-口途径发生；摄食的艰难梭菌孢子幸免于胃酸屏障 并在结肠中萌发^11，12。CDAD的症状可以在抗生素治疗的第一天即开 始，或者直至抗生素治疗结束几周后才开始¹³。最近揭示了如下两种 因素增加在医院获得艰难梭菌建群的患者中症状性疾病发生的可能 性：其它疾病的严重性，毒素A的血清IgG抗体水平降低¹⁴。这些结 果提示预先存在的抗毒素A抗体可改善疾病的严重性，且这种免疫 作用可以有效地预防和控制医院CDAD。

为清楚起见，如果患者出现由艰难梭菌导致的症状性疾病，我们 则定义该患者患有艰难梭菌相关性疾病(CDAD)。腹泻患者粪便中艰 难梭菌毒素的存在通过最普遍认可的诊断方法检测。

艰难梭菌是大约25％的抗生素相关性腹泻的致病因素¹⁵。大多数 艰难梭菌相关性疾病发生在医院或者长期护理机构(每100,000床日 (occupied bed-days)25-60的比例)，导致在美国每年超过300,000 个病例，在许多欧洲国家估计是类似比例。其可以使住院时间延长2 周，每个病例额外费用$6,000-$10,000^{16，17，18，19，20，21}。