[发明专利]嵌合非整倍体干细胞的选择，增殖和使用

权利要求书

1一种检测和定义干或祖细胞群的非整倍体嵌合情况的方法，该 方法包括：

检测群中非整倍体嵌合体的存在，其中在群内的不同细胞中至 少检测到3种不同的核型。

2如权利要求1所述的方法，其中对群内的至少30个细胞进行 非整倍性筛选。

3如权利要求2所述的方法，其中对细胞的非整倍性进行记录。

4如权利要求1所述的方法，其中在群内的不同细胞中检测到至 少5种不同的核型。

5如权利要求1所述的方法，其包括检测具有净亚倍体嵌合核型 的细胞，并从具有净亚倍体嵌合核型的细胞中筛选染色体中至 少部分为亚倍体的干或祖细胞系以进行分化，进一步增殖或移 植。

6如权利要求1所述的方法，其包括检测具有净亚倍体嵌合核型 的细胞，并从具有净亚倍体嵌合核型的细胞中筛选染色体中至 少部分为亚倍体的干或祖细胞系以进行药物筛选。

7如权利要求1所述的方法，其包括检测具有净超倍体嵌合核型 的细胞，并从具有净超倍体嵌合核型的细胞中筛选染色体中至 少部分为超倍体的干或祖细胞系以进行分化，进一步增殖或移 植。

8如权利要求1所述的方法，其包括检测具有净超倍体嵌合核型 的细胞，并从具有净超倍体嵌合核型的细胞中筛选染色体中至 少部分为超倍体的干或祖细胞系以进行药物筛选。

9如权利要求1所述的方法，进一步包括在检测步骤前通过至少 一个周期的细胞分裂对干细胞进行传代。

10如权利要求1所述的方法，其中对细胞群内至少80％的细胞 的核型进行了检测。

11如权利要求1所述的方法，其中该检测步骤包括包含多重荧光 原位杂交在内的荧光原位杂交(FISH)。

12如权利要求1所述的方法，其中该检测步骤包含光谱核型分析 技术(SKY)。

13如权利要求1所述的方法，其中该检测步骤包含G显带，DAPI 或流式细胞术。

14一种与能够分化成为预期细胞类型的细胞相比优先抑制不能 进行分化的细胞的药剂的筛选方法，该方法包括：

将该药剂与具有净超倍体嵌合核型的细胞相接触，其中该细胞 无法分化成为预期细胞类型；并且

选择抑制该细胞增殖的药剂。

15如权利要求14所述的方法，进一步包含以下步骤：

将该药剂与具有亚倍体核型的细胞相接触，其中该细胞能够分 化成为预期细胞类型；并且

选择能够抑制不能分化的超倍体细胞的增殖，但不能明显抑制 能够分化成为预期细胞类型的亚倍体细胞增殖的药剂。

16一种干细胞或祖细胞群的维持或改善方法，该方法包括：

检测细胞群内的细胞中至少一个染色体或其部分的核型；并且 将细胞群中在至少一个染色体或其部分上具有整倍体或亚倍 体核型的细胞与在至少一个染色体或其部分上具有超倍体的 细胞相分离，从而通过去除细胞群中超倍体细胞的同时维持细 胞群中的整倍体或亚倍体细胞来维持或改善干细胞或祖细胞 群。

17如权利要求16所述的方法，其中该检测和分离步骤通过荧光 激活细胞分选(FACS)进行。

18如权利要求16所述的方法，其中在分离步骤后使具有整倍体 或亚倍体核型的细胞分化。

19如权利要求16所述的方法，其中在分离步骤后具有整倍体或 亚倍体核型的细胞被增殖。

20如权利要求16所述的方法，其中在分离步骤后具有整倍体或 亚倍体核型的细胞被移植到个体。