[发明专利]血液凝固异常的治疗方法

权利要求书

1.一种以慢病毒载体为有效成分的血液凝固异常治疗剂，所述慢病毒载体包含编码凝血因子的多核苷酸以及对巨核细胞和/或其衍生的血小板特异性的启动子，该编码凝血因子的多核苷酸功能性的结合于该启动子。

2.权利要求1的治疗剂，其中所述启动子是GPIb启动子或其变体。

3.权利要求2的治疗剂，其中所述编码凝血因子的多核苷酸由5′UTR介导结合于上述启动子。

4.权利要求1的治疗剂，其中所述血液凝固异常为血友病A，凝血因子为第VIII因子或其突变体。

5.权利要求1的治疗剂，其中所述血液凝固异常为血友病B，凝血因子为第IX因子或其突变体。

6.权利要求1的治疗剂，其中所述血液凝固异常为血友病A或血友病B中之一的疾病，凝血因子为第VII因子或其突变体。

7.权利要求1的治疗剂，其中所述慢病毒载体为猴免疫缺陷病毒载体。

8.权利要求1的治疗剂，其中所述慢病毒载体是选自马传染性贫血病毒载体，人免疫缺陷病毒1型载体，人免疫缺陷病毒2型载体，猫免疫缺陷病毒载体，牛发热性疾病病毒载体以及山羊关节炎/脑炎病毒载体中的载体之一。

9.一种感染了慢病毒载体的造血干细胞，其中所述慢病毒载体包含编码凝血因子的多核苷酸以及对巨核细胞和/或其衍生的血小板特异性的启动子，该凝血因子功能性的结合于该启动子。

10.感染了慢病毒载体的巨核细胞和/或其衍生的血小板，其中所述慢病毒载体包含编码凝血因子的多核苷酸以及对巨核细胞和/或其衍生的血小板特异性的启动子，该编码凝血因子的多核苷酸功能性的结合于该启动子。

11.蓄积了凝血因子的巨核细胞和/或血小板的制备方法，该方法包括下述步骤：将慢病毒载体感染到造血干细胞的感染步骤，所述慢病毒载体包含编码凝血因子的多核苷酸以及对巨核细胞和/或其衍生的血小板特异性的启动子，该编码凝血因子的多核苷酸功能性的结合于该启动子；和培养感染了慢病毒载体的造血干细胞直至其分化成含有巨核细胞和/或其衍生的血小板的细胞群的步骤。

12.血液凝固异常的治疗方法，其包括以下步骤：

(a)将慢病毒载体感染到造血干细胞的步骤，其中所述慢病毒载体包含编码凝血因子的多核苷酸以及对巨核细胞和/或其衍生的血小板特异性的启动子，该编码凝血因子的多核苷酸功能性的结合于该启动子；

(b)将(a)的造血干细胞给药到血液凝固异常患者的步骤。

13.权利要求12的方法，其中所述造血干细胞包含采集自患者的造血干细胞。

14.权利要求13的方法，其中所述造血干细胞是包含骨髓干细胞和末梢血造血干细胞中的一种或两种在内的细胞。

15.权利要求12的方法，其中将步骤(a)的造血干细胞培养后给药到患者。

16.一种包含如下组分的血液凝固异常治疗试剂盒：

a：包含编码凝血因子的多核苷酸以及对巨核细胞和/或其衍生的血小板特异性的启动子的慢病毒载体，该编码凝血因子的多核苷酸功能性的结合于该启动子；

b：采集造血干细胞的试剂。

17.权利要求16的血液凝固异常治疗试剂盒，还包含如下组分c：用于诱导造血干细胞分化成巨核细胞的培养基。

18.权利要求17的血液凝固异常治疗试剂盒，其中所述用以诱导造血干细胞分化成巨核细胞的培养基至少包含以下成分：

转铁蛋白；

胰岛素；

干细胞因子；

血小板生成素；

白细胞介素-6；

Flt-3配体；及可溶性白细胞介素-6受体。

19.慢病毒载体用于制备血液凝固异常治疗剂的用途，该慢病毒载体包含有编码凝血因子的多核苷酸以及对巨核细胞和/或其衍生的血小板特异性的启动子，该编码凝血因子的多核苷酸功能性的结合于该启动子。