[发明专利]葡糖淀粉酶变体

权利要求书

1.亲本葡糖淀粉酶的变体，所述变体葡糖淀粉酶与亲本葡糖淀粉酶相比 缩合产物的产量降低。

2.权利要求1的变体，其中所述缩合产物是异麦芽糖。

3.亲本葡糖淀粉酶的变体，其在以下区域之一中包含变化：区域248-255， 例如在位置248、249、250、251、252、253、254和/或255的一个或多个中， 区域309-318，例如在位置309、310、311、312、313、314、315、316、317 和/或318的一个或多个中，和/或区域409-415，例如在位置409、410、411、 412、413、414和/或415的一个或多个中，其中

(a)所述变化独立地是

(i)在占据所述位置的氨基酸的下游插入氨基酸，

(ii)将占据所述位置的氨基酸缺失，或

(iii)用不同的氨基酸取代占据所述位置的氨基酸，

(b)所述变体具有葡糖淀粉酶活性并且

(c)各区域或位置对应于亲本葡糖淀粉酶的氨基酸序列的位置，所述亲本葡 糖淀粉酶具有SEQ ID NO：2的氨基酸序列，和/或对应于同源葡糖淀粉酶中的 区域或位置，所述同源葡糖淀粉酶与SEQ ID NO：2中所示氨基酸序列显示至少 50％同源性。

4.权利要求1-3中任一项的变体，所述变体在以下位置的一个或多个包含 变化：252、312、314、315、412，其中各位置对应于亲本葡糖淀粉酶的氨基 酸序列的位置，所述亲本葡糖淀粉酶具有SEQ ID NO：2的氨基酸序列，和/或 对应于同源葡糖淀粉酶中的位置，所述同源葡糖淀粉酶与SEQ ID NO：2中所示 氨基酸序列显示至少50％同源性。

5.权利要求1或4中任一项的变体，所述变体包含以下变化中的一种或多 种：在位置252取代为A、F、G或V；在位置312取代为S，在位置314取代 为E、F、N、R、T、W或Y；在位置315取代为A、D、F、H、K、L、N、Q、 R、S、T或Y，在位置412取代为D，或在位置314和315之间插入氨基酸残 基I，其中所述各位置对应于亲本葡糖淀粉酶的氨基酸序列的位置，所述亲本 葡糖淀粉酶具有SEQ ID NO：2的氨基酸序列，和/或对应于同源葡糖淀粉酶中 的位置，所述同源葡糖淀粉酶与SEQ ID NO：2中所示氨基酸序列显示至少50％ 同源性。

6.权利要求1至5中任一项的变体，所述变体包含以下取代中的一个或多 个：V312S、Q314E、Q314F、Q314N、Q314R、Q314T、Q314W、Q314Y、 G315A、G315D、G315F、G315H、G315K、G315L、G315N、G315Q、G315R、 G315S、G315T、G315Y、L252A、L252F、L252G、L252V、L412D或在位置 314和315之间插入氨基酸残基I(Q314QI)，其中所述各位置对应于亲本葡糖 淀粉酶的氨基酸序列的位置，所述亲本葡糖淀粉酶具有SEQ ID NO：2的氨基酸 序列，和/或对应于同源葡糖淀粉酶中的位置，所述同源葡糖淀粉酶与SEQ ID NO：2中所示氨基酸序列显示至少50％同源性。

7.权利要求1至6中任一项的变体，所述变体包含取代G315F，其中所述 位置对应于亲本葡糖淀粉酶的氨基酸序列的位置，所述亲本葡糖淀粉酶具有 SEQ ID NO：2的氨基酸序列，和/或对应于同源葡糖淀粉酶中的位置，所述同源 葡糖淀粉酶与SEQ ID NO：2中所示氨基酸序列显示至少50％同源性。

8.权利要求1至6中任一项的变体，所述变体包含取代G315Y，其中所述 位置对应于亲本葡糖淀粉酶的氨基酸序列的位置，所述亲本葡糖淀粉酶具有 SEQ ID NO：2的氨基酸序列，和/或对应于同源葡糖淀粉酶中的位置，所述同源 葡糖淀粉酶与SEQ ID NO：2中所示氨基酸序列显示至少50％同源性。