[发明专利]干细胞的MNTF分化和生长

权利要求书

1.运动神经元营养因子肽类似物制备在分化胚胎干细胞并将后代移植给宿主的方法中使用的 试剂的用途，其中所述胚胎干细胞来自已建立的胚胎干细胞系，所述方法包括：

i)获得所述胚胎干细胞；

ii)在包含运动神经元营养因子肽类似物的培养基中培养所述干细胞群，以诱导所述干细胞分 化成分化的运动神经元；

iii)诱导分化以产生分化的运动神经元；和

iv)将所述分化的运动神经元移植给所述宿主，

其中所述运动神经元营养因子类似物调节不依赖于音猬途径的信号转导途径，所述神经元营 养因子肽类似物选自：a)具有根据SEQIDNO：1的序列的长度为33个氨基酸的MNTF肽； 和b)具有根据SEQIDNO：4的序列的长度为10个氨基酸的MNTF肽。

2.权利要求1的用途，其中所述培养基中包含有效产生神经元后代细胞的量的视黄酸和有效 产生运动神经元的量的所述神经元营养因子肽类似物。

3.运动神经元营养因子肽类似物用于制备药物中的用途，所述药物体内应用在移植的干细胞 或其衍生物部位处或附近内部用于分化所述移植的干细胞或其衍生物，其中所述运动神经元 营养因子类似物调节不依赖于音猬途径的信号转导途径，所述神经元营养因子肽类似物选 自：a)具有根据SEQIDNO：1的序列的长度为33个氨基酸的MNTF肽；和b)具有根据 SEQIDNO：4的序列的长度为10个氨基酸的MNTF肽， 其中所述移植的干细胞来自已建立的胚胎干细胞系。

4.权利要求3的用途，其中所述药物包含有效产生神经元后代细胞的量的视黄酸和有效产生 运动神经元的量的所述神经元营养因子肽类似物。

5.运动神经元营养因子肽类似物制备在用于诱导培养中的胚胎干细胞的方法中使用的试剂的 用途，其中所述胚胎干细胞来自已建立的胚胎干细胞系，所述方法通过以足以诱导所述细胞 分化成分化的运动神经元的量提供运动神经元营养因子肽类似物，其中所述运动神经元营养 因子类似物调节不依赖于音猬途径的信号转导途径，所述神经元营养因子肽类似物选自：a) 具有根据sEQIDNO：1的序列的长度为33个氨基酸的MNTF肽；和b)具有根据SEQID NO：4的序列的长度为10个氨基酸的MNTF肽。

6.权利要求5的用途，其中所述方法用于从已建立的人胚胎干细胞系(hES)生产分化的运动神 经元，并且其中所述方法包括在包含所述神经元营养因子肽类似物的培养基中培养hES细 胞，从而产生其中至少50％的所述细胞表达神经元细胞标记的群体。

7.权利要求5的用途，其中所述方法用于从已建立的人胚胎干细胞系(hES)生产分化的运动神 经元，并且其中所述方法包括在包含所述神经元营养因子肽类似物的培养基中培养hES细 胞，从而产生其中至少55％的所述细胞表达神经元细胞标记的群体。

8.权利要求5的用途，其中所述方法用于从已建立的人胚胎干细胞系(hES)生产分化的运动神 经元，并且其中所述方法包括在包含所述神经元营养因子肽类似物的培养基中培养hES细 胞，从而产生其中至少60％的所述细胞表达神经元细胞标记的群体。

9.权利要求5的用途，其中所述方法用于从已建立的人胚胎干细胞系(hES)生产分化的运动神 经元，并且其中所述方法包括在包含所述神经元营养因子肽类似物的培养基中培养hES细 胞，从而产生其中至少65％的所述细胞表达神经元细胞标记的群体。

10.权利要求5的用途，其中所述方法用于从已建立的人胚胎干细胞系(hES)生产分化的运动 神经元，并且其中所述方法包括在包含所述神经元营养因子肽类似物的培养基中培养hES细 胞，从而产生其中至少70％的所述细胞表达神经元细胞标记的群体。

11.权利要求5的用途，其中所述方法用于从已建立的人胚胎干细胞系(hES)生产分化的运动 神经元，并且其中所述方法包括在包含所述神经元营养因子肽类似物的培养基中培养hES细 胞，从而产生其中至少80％的所述细胞表达神经元细胞标记的群体。