[发明专利]具有恢复的潜能的重编程序细胞的生产

权利要求书

1.一种用于给真核细胞重编程序的方法，所述方法包括：

(a)减少所述真核细胞中的S-腺苷甲硫氨酸与S-腺苷高半胱氨酸 比(SAM与SAH比)。

2.权利要求1的方法，其进一步包括：(b)减少所述真核细胞内 DNA中的5-甲基胞嘧啶水平。

3.权利要求2的方法，其中步骤(a)和(b)同时进行。

4.权利要求2的方法，其中步骤(b)包括特异性抑制所述真核细 胞内的DNA甲基转移酶的表达、活性、或表达和活性。

5.权利要求4的方法，其中步骤(b)包括使所述细胞与DNA甲基 转移酶抑制剂接触。

6.权利要求4的方法，其中步骤(b)包括使所述细胞与抑制有效 量的小干扰核糖核酸(siRNA)接触，所述小干扰核糖核酸的尺寸和构 型设定为抑制DNA甲基转移酶的表达。

7.权利要求1的方法，其中步骤(a)包括使所述细胞与选自SEQ. ID.NOS：1-41的siRNA接触。

8.权利要求1的方法，其中步骤(a)包括增加所述真核细胞内的 甘氨酸-N-甲基转移酶的表达、活性、或表达和活性两者。

9.权利要求8的方法，其中步骤(a)包括使所述细胞与有效增加 所述细胞内的甘氨酸-N-甲基转移酶的表达、活性、或表达和活性两者的 量的视黄酸接触。

10.权利要求1的方法，其中所述SAM与SAH比减少至0.1或更 少。

11.权利要求1的方法，其中所述SAM与SAH比减少至0.5或更 少。

12.权利要求1的方法，其中所述SAM与SAH比减少至1.00或更 少。

13.一种用于给真核细胞重编程序的方法，所述方法包括：

(a)特异性抑制真核细胞内的DNA甲基转移酶的表达、活性、或 表达和活性；和同时

(b)增加所述真核细胞内的甘氨酸-N-甲基转移酶的表达、活性、 或表达和活性两者。

14.权利要求13的方法，其中步骤(a)包括使所述细胞与抑制有 效量的siRNA接触，所述siRNA的尺寸和构型设定为抑制DNA甲基转 移酶的表达。

15.权利要求13的方法，其中步骤(a)包括使所述细胞与抑制有 效量的siRNA接触，所述siRNA的尺寸和构型设定为抑制以使所述细 胞中DNA的5-甲基化胞嘧啶减少至少约5％。

16.权利要求13的方法，其中步骤(b)包括使所述细胞与有效增 加所述细胞内的甘氨酸-N-甲基转移酶的表达、活性、或表达和活性两者 的量的视黄酸接触。

17.权利要求16的方法，其中步骤(b)包括使所述细胞与全反式 视黄酸接触。

18.权利要求16的方法，其中步骤(b)包括使所述细胞与结合视 黄酸受体的化合物接触。

19.权利要求13的方法，其进一步包括与步骤(a)和(b)同时的：

(c)特异性抑制所述细胞内的酶的表达、活性、或表达和活性， 所述酶选自5，10-亚甲四氢叶酸还原酶和胱硫醚β-合酶。

20.权利要求13的方法，其包括使所述细胞与选自SEQ.ID.NOS： 1-41的siRNA接触。

21.一种改变真核细胞中的分化潜能的方法，所述方法包括使所述 真核细胞在体外与一定量的siRNA接触，其中所述siRNA的尺寸和构 型设定为特异性抑制DNA甲基转移酶的表达，前提是所述siRNA不抑 制甘氨酸-N-甲基转移酶的表达，且其中所述量有效诱导全基因组的 DNA脱甲基作用，其中细胞的分化潜能增加。

22.权利要求21的方法，其中所述真核细胞选自干细胞、祖细胞、 体细胞、和实施体细胞核移植的细胞(NT细胞)。