[发明专利]使用ta－siRNA调控基因表达的方法

权利要求书

1.沉默或减弱至少一种靶基因表达的方法，所述方法包括向所述植物或其部分引入或在其中表达包含经修饰的ta-siRNA序列的嵌合核糖核苷酸序列，其中所述序列与天然的ta-siRNA序列相比，通过至少将所述天然ta-siRNA的一个相域替换为下述序列而被修饰，所述序列基本与所述靶基因互补并与所述天然ta-siRNA是异源的。

2.权利要求1的方法，其中所述天然ta-siRNA序列中的微小RNA结合位点已被下述序列替换，所述序列与小RNA序列基本互补，所述小RNA序列能够识别其它RNA序列并介导其切割。

3.权利要求2的方法，其中所述小RNA选自微小RNA，和存在于植物中的siRNA。

4.权利要求1到3中任一项的方法，其中所述天然ta-siRNA由选自以下的序列描述：

a)SEQ ID NO：1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18和/或20所述序列，和

b)与选自SEQ ID NO：1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18和/或20所述序列的序列具有至少60％同一性的序列，和

c)在一定条件下与选自SEQ ID NO：1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18和/或20所述序列的序列或其互补序列杂交的序列，所述条件等价于当使用至少100个核苷酸长度的DNA探针时，在68℃下在由5×SSPE、1％SDS、5×Denhardt′s试剂和100μg/mL变性的鲑精DNA组成的溶液中结合或杂交，然后在包含1×SSC和0.1％SDS的溶液中于室温下洗涤。

5.权利要求1到4中任一项的方法，其中所述修饰的ta-siRNA由下述序列描述，所述序列包含至少一个选自以下的序列：

a)SEQ ID NO：1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18和/或20所述序列，和

b)由SEQ ID NO：1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18和/或20所述序列的至少50个连续核苷酸组成的片段，

c)与选自SEQ ID NO：1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18和/或20所述序列的序列具有至少60％同一性的序列，和

d)在一定条件下与选自SEQ ID NO：1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18和/或20所述序列的序列或其互补序列杂交的序列，所述条件等价于当使用至少100个核苷酸长度的DNA探针时，在68℃下在由5×SSPE、1％SDS、5×Denhardt′s试剂和100μg/mL变性的鲑精DNA组成的溶液中结合或杂交，然后在包含1×SSC和0.1％SDS的溶液中于室温下洗涤。